Siirry sisältöön
B-LCL-HROG02
Kudos
Perifeerinen veri
Sairaus
EBV:n muuntama B-lymfoblastoidinen solulinja (B-LCL); mahasyöpään liittyvä luovuttaja

Asiakirjat

B-LCL-HROG02

Cell line · Tuotenumero 302106

B-LCL-HROG02 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) established from the peripheral blood of a 68-year-old Cau...

€777.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Valmistetaan tilauksesta
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

B-LCL-HROG02 on ihmisen Epstein-Barr-viruksen (EBV) transformoima B-lymfoblastoidinen solulinja (B-LCL), joka on perustettu 68-vuotiaan valkoihoisen miespuolisen mahasyöpäpotilaan ääreisverestä HROG-biopankkisarjan puitteissa; kyseinen sarja on HROC-paksusuoli- ja peräsuolisyövän B-LCL-kokoelman vastine mahasyövän osalta. EBV:n välittämä primaaristen perifeerisen veren B-lymfosyyttien in vitro -immortalisaatio tuotti vakaasti proliferoituvan suspensiosolulinjan, jolla on lymfoblastimainen morfologia. HROG02-solut ilmentävät konstitutiivisesti EBV:n latenssiantigeenejä (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) sekä suuria määriä HLA-luokan I ja II molekyylejä, kostimulatorisia molekyylejä CD80 ja CD86, adheesiomolekyylejä CD54 ja CD58 sekä B-solumarkkereita CD19, CD20 ja CD23.

B-LCL-HROG02:ta käytetään T-solujen ja NK-solujen toiminnallisten määritysten, HLA-tyypityksen, sekoitettujen lymfosyyttireaktioiden, antigeeniesitystutkimusten sekä CTL-induktio-protokollien yhteydessä. HROG-potilaskohtaisessa biopankissa se tarjoaa määritellyn immunologisen vertailukohdan mahasyövän tutkimukselle, mahdollistaen autologiset tai allogeeniset tutkimukset kasvaimeen liittyvistä immuunivasteista. Solulinja tukee mahasyöpään liittyvän T-solujen reaktiivisuuden tutkimusta sekä potilaskohtaisia immuunimääritysjärjestelmiä, jotka liittyvät mahasyövän immunologiaan.

Kudos
Perifeerinen veri
Sairaus
EBV:n muuntama B-lymfoblastoidinen solulinja (B-LCL); mahasyöpään liittyvä luovuttaja
Sovellukset
Immunologian tutkimus; T- ja NK-solujen määritykset; HLA-tyypitys; antigeeniesitystutkimukset; sekalyymfosyyttireaktiot; CTL-määrityksen kohdesolut; mahasyövän immunologia

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Jousitus
GMO-status
GMO-S2
GMO-statuksen tiedot
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Lymfoblastien kaltaiset
Solutyyppi
B-lymfoblasti
Kaksinkertaistumisaika
24-48 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
B-LCL-HROG02 (Cytionin tuotenumero 302106)
NCBI-verotunnus
9606

05Ilmentyminen ja alttius

Virukset
Muuntaja: EBV

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Lisää elatusaineeseen 15–20 % FBS:ää
Soluviljely
Laimenna viljelmä 2–5 × 10⁵ solua/ml:ksi tuoreella, esilämmitetyllä täydellisellä elatusaineella 2–3 päivän välein. Laske elävien solujen määrä ennen siirtoa optimaalisen tiheyden ylläpitämiseksi. Älä anna viljelmien tiheyden ylittää 2 × 10⁶ solua/ml. Tarvittaessa elatusainetta voidaan vaihtaa sentrifugoimalla (300 × g, 5 min). Entsymaattista hajottamista ei tarvita.
Jakosuhde
1–4
Kylvötiheys
2–5 × 10⁵ solua/ml
Nesteen uusiminen
2-3 päivän välein
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa + 10 % DMSO:ta, jotta elinkelpoisuus olisi riittävä sulatuksen jälkeen.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
68 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen