HCE-T

La lignée HCE-T est une lignée cellulaire épithéliale cornéenne humaine transformée par le SV40, dérivée d’un épithélium cornéen humain primaire. Cette lignée a été établie par infection avec un vecteur hybride recombinant SV40-adénovirus (Ad-SV40), permettant l’expression stable de l’antigène T de grande taille du SV40 et une prolifération continue. La caractérisation initiale visait spécifiquement à générer une lignée cellulaire épithéliale cornéenne à croissance continue sans libération de particules virales libres.

En culture, les cellules HCE-T présentent une morphologie épithéliale typique en « pavés » et se développent sous forme de monocouches adhérentes. Des caractéristiques épithéliales ultrastructurales telles que les desmosomes et les microvillosités apicales ont été rapportées, et les cellules ont été décrites comme produisant une kératine de 64 kD associée à la cornée. Dans des conditions de différenciation appropriées (par exemple, culture en interface air-liquide sur du collagène), les cellules HCE-T peuvent former des structures stratifiées multicouches et développer des propriétés de barrière mesurables, ce qui justifie leur utilisation dans la recherche sur la surface oculaire.

Les cellules HCE-T sont largement utilisées pour étudier la fonction de barrière de l’épithélium cornéen, la perméabilité et les effets des formulations, les processus liés à la migration et à la réparation, ainsi que les réponses cellulaires aux stimuli inflammatoires ou irritants. Cependant, les profils d’expression des transporteurs et les profils des marqueurs de différenciation peuvent différer de ceux de la cornée humaine native et des systèmes épithéliaux limbiques/cornéens primaires. Par conséquent, les cellules HCE-T sont particulièrement adaptées aux études in vitro mécanistiques et comparatives, tandis que toute extrapolation quantitative directe à l'absorption cornéenne humaine in vivo ou à la biologie de la différenciation cornéenne doit être effectuée avec prudence.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie