HCE-T

HCE-T je ľudská rohovková epitelová bunková línia transformovaná vírusom SV40, odvodená z primárneho ľudského rohovkového epitelu. Táto línia bola vytvorená infekciou rekombinantným hybridným vektorom SV40–adenovírus (Ad–SV40), ktorý umožňuje stabilnú expresiu veľkého T-antigénu vírusu SV40 a nepretržitú proliferáciu. Pôvodná charakterizácia bola špecificky zameraná na vytvorenie nepretržite rastúcej rohovkovej epitelovej bunkovej línie bez uvoľňovania voľných vírusových častíc.

V kultúre vykazujú bunky HCE-T typickú epiteliálnu „dlažobnú“ morfológiu a rastú ako adhezívne monovrstvy. Boli popísané ultrastrukturálne epiteliálne znaky, ako sú desmozomy a apikálne mikrovili, a bolo zistené, že bunky produkujú keratín s molekulovou hmotnosťou 64 kD asociovaný s rohovkou. Za vhodných podmienok diferenciácie (napr. kultivácia na rozhraní vzduch–kvapalina na kolagéne) môžu bunky HCE-T vytvárať viacvrstvové, stratifikované štruktúry a vyvíjať merateľné bariérové vlastnosti, čo podporuje ich použitie vo výskume povrchu oka.

Bunky HCE-T sa široko používajú na štúdium bariérovej funkcie rohovkového epitelu, permeability a účinkov formulácií, procesov súvisiacich s migráciou/opravou a bunkových reakcií na zápalové alebo dráždivé podnety. Vzorce expresie transportérov a profily diferenciálnych markerov sa však môžu líšiť od pôvodnej ľudskej rohovky a od primárnych limbálnych/rohovkových epitelových systémov. Preto sú HCE-T najvhodnejšie pre mechanistické a komparatívne in vitro štúdie, zatiaľ čo priame kvantitatívne extrapolácie na in vivo absorpciu ľudskej rohovky alebo biológiu diferenciácie rohovky by sa mali vykonávať s opatrnosťou.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke