HCE-T

HCE-T on SV40-ga transformeeritud inimese sarvkesta epiteelirakkude liin, mis on saadud inimese primaarsest sarvkesta epiteelist. Liin loodi nakatamisega rekombinantse SV40–adenoviiruse hübriidvektoriga (Ad–SV40), mis võimaldab SV40 suure T-antigeeni stabiilset ekspressiooni ja pidevat proliferatsiooni. Algse iseloomustamise eesmärk oli luua pidevalt kasvav sarvkesta epiteelirakkude liin, mis ei erita vabasid viirusosakesi.

Kultuuris näitavad HCE-T rakud tüüpilist epiteeli „munakivimorfoloogiat” ja kasvavad adhesiivsetena monokihina. On kirjeldatud epiteeli ultrastruktuurilisi tunnuseid, nagu desmosoomid ja apikaalsed mikrovillid, ning on märgitud, et rakud toodavad sarvkestaga seotud 64 kD keratiini. Sobivates diferentseerumistingimustes (nt õhk-vedeliku piiri kultuur kollageenil) võivad HCE-T-rakud moodustada mitmekihilisi, kihistunud struktuure ja arendada mõõdetavaid barjääriomadusi, mis toetab nende kasutamist silma pinna uuringutes.

HCE-T-rakke kasutatakse laialdaselt sarvkesta epiteeli barjäärifunktsiooni, läbilaskvuse ja ravimvormide mõju, rände/paranemisega seotud protsesside ning rakkude reaktsioonide uurimiseks põletikulistele või ärritavatele stiimulitele. Siiski võivad transpordivalkude ekspressioonimustrid ja diferentseerumismarkerite profiilid erineda loomulikust inimese sarvkestast ja primaarsetest limbaalsetest/sarvkesta epiteelisüsteemidest. Seetõttu sobivad HCE-T-rakud kõige paremini mehhanistilisteks ja võrdlevateks in vitro uuringuteks, samas kui otsest kvantitatiivset ekstrapoleerimist in vivo inimese sarvkesta imendumise või sarvkesta diferentseerumise bioloogia suhtes tuleks teha ettevaatusega.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest