HCE-T

HCE-T, birincil insan kornea epitelinden türetilmiş, SV40 ile dönüştürülmüş bir insan kornea epitel hücre hattıdır. Bu hücre hattı, SV40 büyük T antijeninin istikrarlı bir şekilde eksprese edilmesini ve sürekli çoğalmayı sağlayan rekombinant bir SV40–adenovirüs hibrit vektörü (Ad–SV40) ile enfekte edilerek oluşturulmuştur. İlk karakterizasyon çalışması, serbest viral partiküller yaymadan sürekli büyüyen bir kornea epitel hücre hattı oluşturmayı hedeflemiştir.

Kültürde, HCE-T hücreleri tipik epitel "kaldırım taşı" morfolojisi gösterir ve yapışkan tek tabakalar halinde büyür. Desmozomlar ve apikal mikroviller gibi ultrastrüktürel epitel özellikleri bildirilmiştir ve hücrelerin kornea ile ilişkili 64 kD keratin ürettiği belirtilmiştir. Uygun farklılaşma koşulları altında (örn. kollajen üzerinde hava-sıvı arayüz kültürü), HCE-T hücreleri çok katmanlı, tabakalı yapılar oluşturabilir ve ölçülebilir bariyer özellikleri geliştirebilir; bu da göz yüzeyi araştırmalarında kullanımlarını desteklemektedir.

HCE-T hücreleri, kornea epitel bariyer fonksiyonu, geçirgenlik ve formülasyon etkileri, göç/onarımla ilgili süreçler ve enflamatuar veya tahriş edici uyaranlara karşı hücresel yanıtları incelemek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Bununla birlikte, taşıyıcı ekspresyon modelleri ve farklılaşma belirteç profilleri, doğal insan korneasından ve birincil limbal/korneal epitel sistemlerinden farklılık gösterebilir. Bu nedenle, HCE-T mekanistik ve karşılaştırmalı in vitro çalışmalar için en uygun seçenektir; ancak, in vivo insan kornea emilimi veya kornea farklılaşma biyolojisine yönelik doğrudan kantitatif ekstrapolasyon dikkatle gerçekleştirilmelidir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın