HCE-T

HCE-T הוא קו תאים אפיתליאלי של הקרנית האנושית שעבר טרנספורמציה על ידי SV40, המופק מאפיתל קרנית אנושי ראשוני. הקו הוקם באמצעות הדבקה בנשא היברידי רקומביננטי של SV40 ואדנו-וירוס (Ad–SV40), המאפשר ביטוי יציב של האנטיגן T הגדול של SV40 והתפשטות מתמשכת. האפיון המקורי נועד באופן ספציפי לייצר קו תאים אפיתליאלי של הקרנית בעל צמיחה מתמשכת, ללא שחרור חלקיקים נגיפיים חופשיים.

בתרבית, תאי HCE-T מציגים מורפולוגיה אפיתלית טיפוסית של "אבני ריצוף" וצומחים כשכבה חד-תאית דבקה. דווח על מאפיינים אפיטליאליים אולטרא-מבניים כגון דסמוזומים ומיקרו-וילונות אפיקליים, והתאים תוארו כמפיקים קרטין 64 kD הקשור לקרנית. בתנאי התמיינות מתאימים (למשל, תרבית בממשק אוויר-נוזל על קולגן), תאי HCE-T יכולים ליצור מבנים רב-שכבתיים ומדורגים ולפתח תכונות מחסום מדידות, התומכות בשימושם במחקר על פני שטח העין.

תאי HCE-T נמצאים בשימוש נרחב לחקר תפקוד מחסום האפיתל הקרניתי, חדירות והשפעות של פורמולציות, תהליכים הקשורים להגירה/תיקון, ותגובות תאיות לגירויים דלקתיים או מגרים. עם זאת, דפוסי הביטוי של המובילים ופרופילי סמני ההבחנה עשויים להיות שונים מאלה של הקרנית האנושית הטבעית וממערכות האפיתל הלימבי/קרניתי הראשוניות. לפיכך, HCE-T מתאים ביותר למחקרים מכניים והשוואתיים במבחנה, בעוד שיש לנקוט בזהירות בהסקת מסקנות כמותיות ישירות לגבי ספיגת הקרנית האנושית in vivo או הביולוגיה של התמיינות הקרנית.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו