HCE-T

HCE-T ist eine SV40-transformierte menschliche Hornhautepithelzelllinie, die aus primärem menschlichem Hornhautepithel gewonnen wurde. Die Linie wurde durch Infektion mit einem rekombinanten SV40-Adenovirus-Hybridvektor (Ad–SV40) etabliert, der eine stabile Expression des großen T-Antigens von SV40 und eine kontinuierliche Proliferation ermöglicht. Die ursprüngliche Charakterisierung zielte speziell darauf ab, eine kontinuierlich wachsende Hornhautepithelzelllinie zu erzeugen, die keine freien Viruspartikel freisetzt.

In Kultur zeigen HCE-T-Zellen eine typische epitheliale „Kopfsteinpflaster“-Morphologie und wachsen als adhärente Monoschichten. Es wurde über ultrastrukturelle Epithelmerkmale wie Desmosomen und apikale Mikrovilli berichtet, und es wurde beschrieben, dass die Zellen ein Hornhaut-assoziiertes 64-kD-Keratin produzieren. Unter geeigneten Differenzierungsbedingungen (z. B. Luft-Flüssigkeits-Grenzflächenkultur auf Kollagen) können HCE-T-Zellen mehrschichtige, stratifizierte Strukturen bilden und messbare Barriereeigenschaften entwickeln, was ihre Verwendung in der Forschung zur Augenoberfläche unterstützt.

HCE-T-Zellen werden häufig zur Untersuchung der Barrierefunktion des Hornhautepithels, der Permeabilität und der Auswirkungen von Formulierungen, von Migrations- und Reparaturprozessen sowie der zellulären Reaktionen auf entzündliche oder reizende Stimuli eingesetzt. Allerdings können sich die Expressionsmuster der Transporter und die Profile der Differenzierungsmarker von denen der nativen menschlichen Hornhaut und von primären limbalen/hornhautepithelialen Systemen unterscheiden. Daher eignen sich HCE-T-Zellen am besten für mechanistische und vergleichende In-vitro-Studien, während eine direkte quantitative Extrapolation auf die In-vivo-Absorption in der menschlichen Hornhaut oder die Biologie der Hornhautdifferenzierung mit Vorsicht erfolgen sollte.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung