HCE-T

HCE-Tは、初代ヒト角膜上皮由来のSV40形質転換ヒト角膜上皮細胞株である。この細胞株は、組換えSV40-アデノウイルスハイブリッドベクター（Ad–SV40）による感染によって樹立され、SV40大型T抗原の安定発現と持続的な増殖が可能となっている。当初の特性評価は、遊離ウイルス粒子を放出することなく、持続的に増殖する角膜上皮細胞株を作製することを特に目的として行われた。

培養下において、HCE-T細胞は典型的な上皮の「石畳様」形態を示し、付着性単層として増殖する。 デスモソームや頂端微絨毛などの上皮の超微細構造的特徴が報告されており、これらの細胞は角膜関連の64 kDケラチンを産生するとされている。適切な分化条件（例：コラーゲン上での気液界面培養）下では、HCE-T細胞は多層の重層構造を形成し、測定可能なバリア特性を発現するため、眼表面研究における利用が可能である。

HCE-T細胞は、角膜上皮のバリア機能、透過性および製剤の影響、遊走・修復関連プロセス、ならびに炎症性または刺激性刺激に対する細胞応答の研究に広く利用されている。しかし、トランスポーターの発現パターンや分化マーカーのプロファイルは、天然のヒト角膜や一次の輪部／角膜上皮系とは異なる場合がある。 したがって、HCE-Tは機序解明や比較を目的としたin vitro研究には最適であるが、in vivoにおけるヒト角膜の吸収や角膜分化生物学への直接的な定量的外挿を行う際には、慎重を期すべきである。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。