HCE-T

Η HCE-T είναι μια σειρά ανθρώπινων επιθηλιακών κυττάρων του κερατοειδούς που έχουν μετασχηματιστεί με τον ιό SV40 και προέρχονται από πρωτογενές ανθρώπινο επιθήλιο του κερατοειδούς. Η σειρά δημιουργήθηκε μέσω μόλυνσης με έναν ανασυνδυασμένο υβριδικό φορέα SV40–αδενοϊού (Ad–SV40), ο οποίος επιτρέπει τη σταθερή έκφραση του μεγάλου Τ-αντιγόνου του SV40 και τη συνεχή πολλαπλασιασμό. Ο αρχικός χαρακτηρισμός είχε ως συγκεκριμένο στόχο τη δημιουργία μιας σειράς επιθηλιακών κυττάρων του κερατοειδούς που αναπτύσσεται συνεχώς χωρίς να εκλύει ελεύθερα ιικά σωματίδια.

Σε καλλιέργεια, τα κύτταρα HCE-T παρουσιάζουν τυπική επιθηλιακή μορφολογία «κυβόλιθου» και αναπτύσσονται ως προσκολλημένα μονοστρωματικά κύτταρα. Έχουν αναφερθεί υπερδομικά επιθηλιακά χαρακτηριστικά, όπως δεσμοσώματα και κορυφαίες μικροβίλλες, και τα κύτταρα έχουν περιγραφεί ως παραγωγοί κερατίνης 64 kD που σχετίζεται με τον κερατοειδή. Υπό κατάλληλες συνθήκες διαφοροποίησης (π.χ. καλλιέργεια διεπαφής αέρα-υγρού σε κολλαγόνο), τα κύτταρα HCE-T μπορούν να σχηματίσουν πολυστρωματικές, στρωματοποιημένες δομές και να αναπτύξουν μετρήσιμες ιδιότητες φραγμού, υποστηρίζοντας τη χρήση τους στην έρευνα της οφθαλμικής επιφάνειας.

Τα κύτταρα HCE-T χρησιμοποιούνται ευρέως για τη μελέτη της λειτουργίας του επιθηλιακού φραγμού του κερατοειδούς, της διαπερατότητας και των επιδράσεων των σκευασμάτων, των διαδικασιών που σχετίζονται με τη μετανάστευση/επανόρθωση, καθώς και των κυτταρικών αποκρίσεων σε φλεγμονώδη ή ερεθιστικά ερεθίσματα. Ωστόσο, τα πρότυπα έκφρασης των μεταφορέων και τα προφίλ των δεικτών διαφοροποίησης μπορεί να διαφέρουν από τον φυσικό ανθρώπινο κερατοειδή και από τα πρωτογενή συστήματα του επιθηλίου του κερατοειδούς και του λιμπού. Επομένως, τα HCE-T είναι πιο κατάλληλα για μηχανιστικές και συγκριτικές in vitro μελέτες, ενώ η άμεση ποσοτική εξάπλωση στην in vivo απορρόφηση του ανθρώπινου κερατοειδούς ή στη βιολογία της διαφοροποίησης του κερατοειδούς πρέπει να πραγματοποιείται με προσοχή.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης