HCE-T

HCE-T เป็นสายเซลล์เยื่อบุผิวกระจกตาของมนุษย์ที่ผ่านการเปลี่ยนแปลงด้วย SV40 ซึ่งได้มาจากเยื่อบุผิวกระจกตาของมนุษย์โดยตรง สายเซลล์นี้ถูกสร้างขึ้นโดยการติดเชื้อด้วยเวกเตอร์ไฮบริด SV40–adenovirus ที่ดัดแปลงพันธุกรรม (Ad–SV40) ซึ่งทำให้สามารถแสดงออกของแอนติเจน SV40 large T ได้อย่างคงที่และมีการเพิ่มจำนวนเซลล์อย่างต่อเนื่อง การศึกษาลักษณะเฉพาะของสายเซลล์นี้มุ่งเน้นโดยเฉพาะในการสร้างสายเซลล์เยื่อบุผิวกระจกตาที่สามารถเจริญเติบโตได้อย่างต่อเนื่องโดยไม่มีการปล่อยอนุภาคไวรัสอิสระออกมา

ในวัฒนธรรม HCE-T cells แสดงลักษณะทางวัฒนธรรมของเซลล์เยื่อบุผิวแบบ "ก้อนหิน" และเจริญเติบโตเป็นชั้นเดียวที่เกาะติดกัน ลักษณะโครงสร้างระดับจุลภาคของเซลล์เยื่อบุผิว เช่น เดสโมโซมและไมโครวิลไลที่ปลายยอดเซลล์ ได้รับการรายงานแล้ว และมีการอธิบายว่าเซลล์เหล่านี้สามารถผลิตเคราตินชนิด 64 กิโลดาลตัน ซึ่งเกี่ยวข้องกับกระจกตา ภายใต้สภาวะการแยกตัวที่เหมาะสม (เช่น การเพาะเลี้ยงที่ผิวสัมผัสระหว่างอากาศกับของเหลวบนคอลลาเจน) เซลล์ HCE-T สามารถสร้างโครงสร้างหลายชั้นแบบเรียงชั้นและพัฒนาคุณสมบัติการเป็นเกราะกั้นที่สามารถวัดได้ ซึ่งสนับสนุนการใช้เซลล์เหล่านี้ในการวิจัยเกี่ยวกับพื้นผิวกระจกตา

เซลล์ HCE-T ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการศึกษาการทำงานของเยื่อบุผิวกระจกตา การซึมผ่านของสารและผลกระทบจากสูตรยา กระบวนการที่เกี่ยวข้องกับการเคลื่อนที่/ซ่อมแซม และการตอบสนองของเซลล์ต่อสิ่งกระตุ้นที่ทำให้เกิดการอักเสบหรือระคายเคือง อย่างไรก็ตาม รูปแบบการแสดงออกของตัวขนส่งโปรตีนและโปรไฟล์ของตัวบ่งชี้การแยกตัวอาจแตกต่างจากกระจกตาของมนุษย์ธรรมชาติและจากระบบเยื่อบุผิวลิมบัส/กระจกตาปฐมภูมิ ดังนั้น HCE-T จึงเหมาะสมที่สุดสำหรับการศึกษาเชิงกลไกและการเปรียบเทียบในหลอดทดลอง ในขณะที่การประมาณค่าเชิงปริมาณโดยตรงกับการดูดซึมในกระจกตาของมนุษย์ในร่างกายหรือชีววิทยาการแยกตัวของกระจกตาควรดำเนินการด้วยความระมัดระวัง

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.