Перейти до вмісту
HCE-T
Тканина
Око, рогівка, епітелій
Синоніми
HCET, Human Corneal Epithelial cells-Transformed, HCE, SV40-HCEC

Документи

HCE-T

Cell line · Номер товару 305255

€800.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

HCE-T — це трансформована вірусом SV40 лінія клітин епітелію рогівки людини, отримана з первинного епітелію рогівки людини. Лінія була створена шляхом інфікування рекомбінантним гібридним вектором SV40–аденовірусу (Ad–SV40), що забезпечило стабільну експресію великого Т-антигену SV40 та безперервну проліферацію. Первинна характеристика була спрямована саме на створення лінії клітин епітелію рогівки, здатної до безперервного росту без виділення вільних вірусних частинок.

У культурі клітини HCE-T демонструють типову епітеліальну «бруківкову» морфологію та ростуть у вигляді адгезивних моношарів. Повідомлялося про ультраструктурні епітеліальні особливості, такі як десмосоми та апікальні мікровілі, а клітини описували як такі, що продукують пов'язаний з рогівкою кератин молекулярною масою 64 кДа. За відповідних умов диференціації (наприклад, культивування на межі повітря–рідина на колагені) клітини HCE-T можуть утворювати багатошарові, стратифіковані структури та розвивати вимірювані бар'єрні властивості, що підтримує їх використання в дослідженнях поверхні ока.

Клітини HCE-T широко використовуються для вивчення бар’єрної функції епітелію рогівки, проникності та впливу препаратів, процесів, пов’язаних з міграцією/відновленням, а також клітинних реакцій на запальні або подразнювальні подразники. Однак патерни експресії транспортерів та профілі маркерів диференціації можуть відрізнятися від природної рогівки людини та від первинних систем лімбального/рогівкового епітелію. Тому клітини HCE-T найкраще підходять для механістичних та порівняльних досліджень in vitro, тоді як пряму кількісну екстраполяцію на in vivo абсорбцію рогівки людини або біологію диференціації рогівки слід проводити з обережністю.

Тканина
Око, рогівка, епітелій
Синоніми
  • HCET
  • Human Corneal Epithelial cells-Transformed
  • HCE
  • SV40-HCEC

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
GMO-S1
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S1: This human corneal epithelial cell line (HCE-T) contains an SV40 early-region construct (RSV-T / pRSV-T vector), enabling immortalization. The insert is stably integrated into primary human corneal epithelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальний
Тип клітини
Епітеліальна клітина

04Ідентифікатори

Посилання
HCE-T (номер за каталогом Cytion 305255)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_1272

05Експресія та сприйнятливість

Віруси
Трансформант: плазміду RSV-T (pRSV-T). Ця плазміда являє собою орі-конструкцію SV40, що містить гени ранньої ділянки SV40 та довгий кінцевий повтор вірусу саркоми Рус.
Продукція
Кератин (64kD)

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 г/л Глюкоза, w: 2,5 мМ L-глутамін, w: 15 мМ HEPES, w: 0,5 мМ Піруват натрію, w: 1,2 г/л NaHCO3 (цит. номер 820400a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 5% FBS, 1% ITS (0,625 мг/мл людського інсуліну, 0,625 мг/мл людського трансферину, 0,625 мкг/мл селеніту натрію, 0,535 мг/мл лінолевої кислоти, 125 мг/мл BSA) та 10 нг/мл людського EGF
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
49 років
Етнічна приналежність
Японський

10Детальна інформація про товар

Таблиця складу