HCE-T

HCE-T je lidská rohovková epiteliální buněčná linie transformovaná virem SV40, odvozená z primárního lidského rohovkového epitelu. Tato linie byla vytvořena infekcí rekombinantním hybridním vektorem SV40–adenoviru (Ad–SV40), který umožňuje stabilní expresi velkého T-antigenu SV40 a nepřetržitou proliferaci. Původní charakterizace byla specificky zaměřena na vytvoření nepřetržitě rostoucí rohovkové epiteliální buněčné linie bez uvolňování volných virových částic.

V kultuře vykazují buňky HCE-T typickou epiteliální „dláždicovou“ morfologii a rostou jako adhezivní monovrstvy. Byly popsány ultrastrukturální epiteliální znaky, jako jsou desmosomy a apikální mikrovilli, a bylo popsáno, že buňky produkují keratin o molekulové hmotnosti 64 kD asociovaný s rohovkou. Za vhodných diferenciačních podmínek (např. kultivace na rozhraní vzduch–kapalina na kolagenu) mohou buňky HCE-T tvořit vícevrstvé, stratifikované struktury a vyvinout měřitelné bariérové vlastnosti, což podporuje jejich použití ve výzkumu očního povrchu.

Buňky HCE-T se široce používají ke studiu bariérové funkce rohovkového epitelu, permeability a účinků formulací, procesů souvisejících s migrací/opravou a buněčných reakcí na zánětlivé nebo dráždivé podněty. Vzory exprese transportérů a profily diferenciačních markerů se však mohou lišit od přirozené lidské rohovky a od primárních limbálních/rohovkových epitelových systémů. Proto jsou HCE-T nejvhodnější pro mechanistické a srovnávací in vitro studie, zatímco přímá kvantitativní extrapolace na in vivo absorpci lidské rohovky nebo biologii diferenciace rohovky by měla být prováděna s opatrností.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení