HCE-T

A HCE-T egy SV40-vel transzformált emberi szaruhártya-epithelsejtvonal, amelyet elsődleges emberi szaruhártya-epithelből nyertek. A vonalat egy rekombináns SV40–adenovírus hibrid vektorral (Ad–SV40) történő fertőzéssel hozták létre, ami lehetővé tette az SV40 nagy T-antigén stabil expresszióját és a sejtek folyamatos szaporodását. Az eredeti jellemzés kifejezetten arra irányult, hogy olyan folyamatosan szaporodó szaruhártya-epithelsejtvonalat hozzanak létre, amely nem bocsát ki szabad vírusrészecskéket.

Tenyészetben a HCE-T sejtek tipikus epitheliális „macskaköves” morfológiát mutatnak, és adhezív monorétegként növekednek. Ultrastrukturális epitheliális jellemzőkről, például deszmozómákról és apikális mikrovillusokról számoltak be, és a sejteket úgy írták le, hogy szaruhártyához kapcsolódó 64 kD-os keratint termelnek. Megfelelő differenciálódási körülmények között (pl. kollagénon végzett levegő–folyadék határfelületi tenyésztés) a HCE-T sejtek többrétegű, réteges struktúrákat képezhetnek, és mérhető gátló tulajdonságokat fejleszthetnek ki, ami alátámasztja alkalmazásukat a szemfelszíni kutatásokban.

A HCE-T sejteket széles körben használják a szaruhártya-epiteliális gátfunkció, a permeabilitás és a készítmények hatásainak, a migrációval/helyreállítással kapcsolatos folyamatok, valamint a gyulladásos vagy irritáló ingerekre adott sejtválaszok tanulmányozására. A transzporterek expressziós mintázata és a differenciálódási markerek profilja azonban eltérhet a natív emberi szaruhártyától és az elsődleges limbus/szaruhártya-epiteliális rendszerektől. Ezért a HCE-T leginkább mechanisztikus és összehasonlító in vitro vizsgálatokra alkalmas, míg az in vivo emberi szaruhártya-abszorpcióra vagy a szaruhártya-differenciálódás biológiájára vonatkozó közvetlen kvantitatív extrapolációt óvatosan kell elvégezni.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban