HCE-T

A HCE-T é uma linha celular de epitélio corneano humano transformada pelo SV40, derivada do epitélio corneano humano primário. A linha foi estabelecida através da infecção com um vetor híbrido recombinante de adenovírus-SV40 (Ad–SV40), permitindo a expressão estável do antígeno T grande do SV40 e a proliferação contínua. A caracterização original visava especificamente gerar uma linha celular de epitélio corneano em crescimento contínuo, sem libertação de partículas virais livres.

Em cultura, as células HCE-T apresentam a morfologia epitelial típica em «pavimento de calçada» e crescem como monocamadas aderentes. Foram relatadas características epiteliais ultraestruturais, tais como desmossomas e microvilosidades apicais, e as células foram descritas como produtoras de uma queratina de 64 kD associada à córnea. Em condições de diferenciação adequadas (por exemplo, cultura em interface ar-líquido sobre colagénio), as células HCE-T podem formar estruturas estratificadas em múltiplas camadas e desenvolver propriedades de barreira mensuráveis, o que sustenta a sua utilização na investigação da superfície ocular.

As células HCE-T são amplamente utilizadas para estudar a função de barreira do epitélio da córnea, a permeabilidade e os efeitos da formulação, os processos relacionados com a migração/reparação e as respostas celulares a estímulos inflamatórios ou irritantes. No entanto, os padrões de expressão dos transportadores e os perfis dos marcadores de diferenciação podem diferir da córnea humana nativa e dos sistemas epiteliais limbares/corneais primários. Por conseguinte, as HCE-T são mais adequadas para estudos in vitro mecanísticos e comparativos, devendo a extrapolação quantitativa direta para a absorção da córnea humana in vivo ou para a biologia da diferenciação da córnea ser realizada com cautela.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia