HCE-T

HCE-T er en SV40-transformert human hornhinneepitelcellelinje avledet fra primært humant hornhinneepitel. Linjen ble etablert ved infeksjon med en rekombinant SV40–adenovirus-hybridvektor (Ad–SV40), noe som muliggjør stabil ekspresjon av SV40-stort T-antigen og kontinuerlig proliferasjon. Den opprinnelige karakteriseringen hadde spesifikt som mål å generere en kontinuerlig voksende hornhinneepitelcellelinje uten utsondring av frie viruspartikler.

I kultur viser HCE-T-celler typisk epitelial «brosteinsmorfologi» og vokser som vedheftende monolag. Ultrastrukturelle epitelegenskaper som desmosomer og apikale mikrovilli er rapportert, og cellene er beskrevet som produsenter av et hornhinneassosiert 64 kD keratin. Under egnede differensieringsbetingelser (f.eks. luft–væske-grensesnittkultur på kollagen) kan HCE-T-celler danne flerlags, stratifiserte strukturer og utvikle målbare barriereegenskaper, noe som støtter deres bruk i forskning på øyets overflate.

HCE-T-celler brukes mye til å studere hornhinneepitelets barrierefunksjon, permeabilitet og formuleringseffekter, migrasjons-/reparasjonsrelaterte prosesser og cellulære responser på inflammatoriske eller irriterende stimuli. Imidlertid kan transportøruttrykkmønstre og differensieringsmarkørprofiler avvike fra naturlig menneskelig hornhinne og fra primære limbal-/hornhinneepitelsystemer. Derfor er HCE-T best egnet for mekanistiske og komparative in vitro-studier, mens direkte kvantitativ ekstrapolering til in vivo-absorpsjon i menneskelig hornhinne eller hornhinnedifferensieringsbiologi bør utføres med forsiktighet.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring