HCE-T

La lignée HCE-T est une lignée cellulaire épithéliale cornéenne humaine transformée par le SV40, dérivée d’un épithélium cornéen humain primaire. Cette lignée a été établie par infection à l’aide d’un vecteur hybride recombinant SV40-adénovirus (Ad–SV40), permettant l’expression stable de l’antigène T de grande taille du SV40 et une prolifération continue. La caractérisation initiale visait spécifiquement à générer une lignée cellulaire épithéliale cornéenne à croissance continue sans libération de particules virales libres.

En culture, les cellules HCE-T présentent une morphologie épithéliale typique en « pavés » et se développent sous forme de monocouches adhérentes. Des caractéristiques épithéliales ultrastructurales, telles que les desmosomes et les microvillosités apicales, ont été rapportées, et il a été établi que ces cellules produisent une kératine de 64 kD associée à la cornée. Dans des conditions de différenciation appropriées (p. ex., culture à l’interface air-liquide sur du collagène), les cellules HCE-T peuvent former des structures stratifiées multicouches et développer des propriétés de barrière mesurables, ce qui justifie leur utilisation dans la recherche sur la surface oculaire.

Les cellules HCE-T sont largement utilisées pour étudier la fonction de barrière de l’épithélium cornéen, la perméabilité et les effets des formulations, les processus liés à la migration et à la réparation, ainsi que les réponses cellulaires aux stimuli inflammatoires ou irritants. Cependant, les profils d’expression des transporteurs et les profils des marqueurs de différenciation peuvent différer de ceux de la cornée humaine native et des systèmes épithéliaux limbaires ou cornéens primaires. Par conséquent, les cellules HCE-T conviennent particulièrement aux études in vitro mécanistiques et comparatives, tandis que toute extrapolation quantitative directe à l’absorption cornéenne humaine in vivo ou à la biologie de la différenciation cornéenne doit être effectuée avec prudence.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.