HCE-T

HCE-T è una linea cellulare epiteliale corneale umana trasformata con SV40, derivata dall'epitelio corneale umano primario. La linea è stata ottenuta mediante infezione con un vettore ibrido ricombinante SV40-adenovirus (Ad-SV40), che consente l'espressione stabile dell'antigene T grande dell'SV40 e la proliferazione continua. La caratterizzazione iniziale mirava specificatamente a generare una linea cellulare epiteliale corneale in crescita continua senza rilascio di particelle virali libere.

In coltura, le cellule HCE-T mostrano la tipica morfologia epiteliale a "ciottoli" e crescono come monostrati aderenti. Sono state segnalate caratteristiche epiteliali ultrastrutturali quali desmosomi e microvilli apicali, e le cellule sono state descritte come produttrici di una cheratina da 64 kD associata alla cornea. In condizioni di differenziazione adeguate (ad es. coltura a interfaccia aria-liquido su collagene), le cellule HCE-T possono formare strutture stratificate a più strati e sviluppare proprietà di barriera misurabili, a sostegno del loro impiego nella ricerca sulla superficie oculare.

Le cellule HCE-T sono ampiamente utilizzate per studiare la funzione di barriera dell'epitelio corneale, la permeabilità e gli effetti delle formulazioni, i processi legati alla migrazione e alla riparazione, nonché le risposte cellulari a stimoli infiammatori o irritanti. Tuttavia, i modelli di espressione dei trasportatori e i profili dei marcatori di differenziazione possono differire dalla cornea umana nativa e dai sistemi epiteliali limbali/corneali primari. Pertanto, le cellule HCE-T sono più adatte per studi in vitro meccanicistici e comparativi, mentre l’estrapolazione quantitativa diretta all’assorbimento corneale umano in vivo o alla biologia della differenziazione corneale deve essere effettuata con cautela.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia