HCE-T

HCE-T is een door SV40 getransformeerde menselijke hoornvliesepitheelcellijn die is afgeleid van primair menselijk hoornvliesepitheel. De lijn is tot stand gebracht door infectie met een recombinant SV40–adenovirus-hybridevector (Ad–SV40), waardoor stabiele expressie van het grote T-antigeen van SV40 en continue proliferatie mogelijk werden. De oorspronkelijke karakterisering was specifiek gericht op het genereren van een continu groeiende hoornvliesepitheelcellijn zonder dat er vrije virale deeltjes vrijkomen.

In kweek vertonen HCE-T-cellen de typische epitheliale 'kasseien'-morfologie en groeien ze als hechtende monolaagjes. Er zijn ultrastructurele epitheliale kenmerken zoals desmosomen en apicale microvilli gerapporteerd, en er is beschreven dat de cellen een hoornvlies-geassocieerd 64 kD-keratine produceren. Onder geschikte differentiatieomstandigheden (bijv. lucht-vloeistof-grensvlakcultuur op collageen) kunnen HCE-T-cellen meerlaagse, gelaagde structuren vormen en meetbare barrière-eigenschappen ontwikkelen, wat hun gebruik in onderzoek naar het oogoppervlak ondersteunt.

HCE-T-cellen worden op grote schaal gebruikt voor het bestuderen van de barrièrefunctie van het hoornvliesepitheel, permeabiliteit en effecten van formuleringen, migratie- en herstelgerelateerde processen, en cellulaire reacties op inflammatoire of irriterende prikkels. De expressiepatronen van transporters en de profielen van differentiatiemarkers kunnen echter verschillen van die van het natuurlijke menselijke hoornvlies en van primaire limbus-/hoornvliesepitheelsystemen. Daarom is HCE-T het meest geschikt voor mechanistische en vergelijkende in-vitro-studies, terwijl directe kwantitatieve extrapolatie naar in-vivo-absorptie door het menselijk hoornvlies of de biologie van hoornvliesdifferentiatie met de nodige voorzichtigheid moet worden uitgevoerd.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring