IEC-18

La lignée cellulaire IEC-18 est une lignée de cellules épithéliales non transformées dérivées des cellules de la crypte de l'intestin grêle du rat. Il a été démontré que ces cellules modélisent efficacement les propriétés physiologiques de l'épithélium de l'intestin grêle, en particulier en ce qui concerne le transport des ions chlorure (Cl-). Les canaux chlorure des cellules IEC-18 présentent des types distincts de conductances qui répondent à divers stimuli tels que le gonflement des cellules, l'augmentation du calcium intracellulaire (Ca²⁺) et l'élévation de l'AMP cyclique (AMPc). Par exemple, les courants Cl- activés par le gonflement dans les cellules IEC-18 sont caractérisés par une rectification vers l'extérieur et une indépendance vis-à-vis du voltage. En outre, les cellules IEC-18 expriment des canaux CFTR (cystic fibrosis transmembrane conductance regulator), comme en témoigne la présence d'une conductance Cl- activée par l'AMPc, qui peut être inhibée par le glibenclamide et l'acide 5-nitro-2-(3-phenylpropylamino) benzoïque (NPPB), mais qui n'est pas affectée par le DIDS.

Les cellules IEC-18 ont également été utilisées pour explorer les mécanismes de survie cellulaire en cas de stress induit par le détachement, connu sous le nom d'anoikis. La recherche indique que la prostaglandine E2 (PGE2) peut promouvoir la viabilité et l'agrégation des cellules IEC-18 détachées par le biais de voies de signalisation médiées par l'AMPc. Cette protection contre l'anoikis est associée à l'activation de l'adénylate cyclase et de la protéine kinase A (PKA), ce qui renforce l'adhésion et la viabilité des cellules, même à l'état suspendu. Ces résultats sont importants pour comprendre les processus liés à l'inflammation et les contributions potentielles à la carcinogenèse dans les tissus intestinaux.

En outre, les monocouches IEC-18 ont été utilisées pour étudier le transport de diverses molécules à travers la barrière intestinale. Par rapport à la lignée cellulaire Caco-2, les cellules IEC-18 constituent un modèle plus précis pour le transport passif transcellulaire et paracellulaire en raison de leurs similitudes structurelles avec les cellules de la crypte de l'intestin grêle. Contrairement aux cellules Caco-2, qui possèdent d'importantes capacités de transport actif, les cellules IEC-18 présentent un transport à médiation minimale, ce qui en fait un choix plus approprié pour l'analyse de la perméabilité passive des macromolécules hydrophiles.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie