IEC-18

IEC-18細胞株は、ラット小腸の陰窩細胞由来の非形質転換上皮細胞株である。これらの細胞は、特に塩化物イオン（Cl-）輸送に関して、小腸上皮の生理学的特性を効果的にモデル化することが示されている。IEC-18細胞のクロライド・チャネルは、細胞の膨潤、細胞内カルシウム（Ca²⁺）の増加、サイクリックAMP（cAMP）の上昇といった様々な刺激に応答する、異なるタイプのコンダクタンスを示す。例えば、IEC-18細胞の膨潤活性化Cl-電流は、外向き整流と電圧非依存性を特徴とする。さらに、IEC-18細胞は嚢胞性線維症膜貫通コンダクタンス制御因子（CFTR）チャネルを発現しており、cAMP活性化Cl-コンダクタンスが存在することから、このチャネルはグリベンクラミドや5-ニトロ-2-(3-フェニルプロピルアミノ)安息香酸（NPPB）によって阻害されるが、DIDSには影響されないことが証明されている。

IEC-18細胞はまた、アノイキスとして知られる剥離誘導ストレス下での細胞生存メカニズムを探るためにも用いられてきた。研究によると、プロスタグランジンE2（PGE2）は、cAMPを介したシグナル伝達経路を通じて、剥離したIEC-18細胞の細胞生存能と凝集を促進する。このアノイキスからの保護は、アデニル酸シクラーゼとプロテインキナーゼA（PKA）の活性化と関連しており、浮遊状態でも細胞接着と生存能力を高める。このような知見は、炎症に関連したプロセスや腸管組織における発がんへの潜在的な寄与を理解する上で重要である。

さらにIEC-18単層は、腸関門を通過する様々な分子の輸送を研究するために用いられてきた。Caco-2細胞株と比較して、IEC-18細胞は小腸陰窩細胞と構造的に類似しているため、受動的な経細胞および傍細胞輸送のより正確なモデルを提供する。有意な能動輸送能を有するCaco-2細胞とは異なり、IEC-18細胞はキャリアを介した輸送を最小限に抑えているため、親水性高分子の受動的透過性を分析するのに適した選択といえる。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。