IEC-18

Die IEC-18-Zelllinie ist eine nicht transformierte Epithelzelllinie, die aus den Kryptenzellen des Ratten-Dünndarms stammt. Es hat sich gezeigt, dass diese Zellen die physiologischen Eigenschaften des Dünndarmepithels effektiv nachbilden, insbesondere im Hinblick auf den Chloridionentransport (Cl-). Chloridkanäle in IEC-18-Zellen weisen unterschiedliche Arten von Leitfähigkeiten auf, die auf verschiedene Stimuli wie Zellschwellung, erhöhtes intrazelluläres Kalzium (Ca²⁺) und erhöhtes zyklisches AMP (cAMP) reagieren. So sind beispielsweise die durch Schwellung aktivierten Cl-Ströme in IEC-18-Zellen durch Gleichrichtung nach außen und Spannungsunabhängigkeit gekennzeichnet. Darüber hinaus exprimieren IEC-18-Zellen CFTR-Kanäle (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator), was durch das Vorhandensein von cAMP-aktivierten Cl-Strömen belegt wird, die durch Glibenclamid und 5-Nitro-2-(3-Phenylpropylamino)-benzoesäure (NPPB) gehemmt werden können, aber nicht durch DIDS beeinflusst werden.

IEC-18-Zellen wurden auch zur Erforschung von Zellüberlebensmechanismen unter Ablösungsstress, dem so genannten Anoikis, verwendet. Forschungsergebnisse deuten darauf hin, dass Prostaglandin E2 (PGE2) die Zelllebensfähigkeit und -aggregation in abgelösten IEC-18-Zellen durch cAMP-vermittelte Signalwege fördern kann. Dieser Schutz vor Anoikis ist mit der Aktivierung der Adenylatzyklase und der Proteinkinase A (PKA) verbunden, wodurch die Zelladhäsion und Lebensfähigkeit auch im suspendierten Zustand verbessert werden. Diese Ergebnisse sind wichtig für das Verständnis entzündungsbedingter Prozesse und möglicher Beiträge zur Krebsentstehung in Darmgeweben.

Darüber hinaus wurden IEC-18-Monolayer eingesetzt, um den Transport verschiedener Moleküle durch die Darmbarriere zu untersuchen. Im Vergleich zur Caco-2-Zelllinie bieten IEC-18-Zellen aufgrund ihrer strukturellen Ähnlichkeit mit den Kryptenzellen des Dünndarms ein genaueres Modell für den passiven transzellulären und parazellulären Transport. Im Gegensatz zu Caco-2-Zellen, die über erhebliche aktive Transportfähigkeiten verfügen, zeigen IEC-18-Zellen nur einen minimalen Carrier-vermittelten Transport, wodurch sie sich besser für die Analyse der passiven Permeabilität hydrophiler Makromoleküle eignen.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung