IEC-18

Bunková línia IEC-18 je netransformovaná epitelová bunková línia odvodená z buniek krypty tenkého čreva potkanov. Ukázalo sa, že tieto bunky účinne modelujú fyziologické vlastnosti epitelu tenkého čreva, najmä pokiaľ ide o transport chloridových iónov (Cl-). Chloridové kanály v bunkách IEC-18 vykazujú odlišné typy vodivosti, ktoré reagujú na rôzne podnety, ako je napríklad opuch buniek, zvýšený intracelulárny vápnik (Ca²⁺) a zvýšený cyklický AMP (cAMP). Napríklad Cl- prúdy aktivované opuchom v bunkách IEC-18 sa vyznačujú rektifikáciou smerom von a nezávislosťou od napätia. Okrem toho bunky IEC-18 exprimujú kanály regulátora transmembránovej vodivosti pri cystickej fibróze (CFTR), o čom svedčí prítomnosť cAMP aktivovanej Cl- vodivosti, ktorú možno inhibovať glibenklamidom a 5-nitro-2-(3-fenylpropylamino)benzoovou kyselinou (NPPB), ale neovplyvňuje ju DIDS.

Bunky IEC-18 sa použili aj na skúmanie mechanizmov prežitia buniek pri strese vyvolanom oddeľovaním, známom ako anoikis. Výskum naznačuje, že prostaglandín E2 (PGE2) môže podporovať životaschopnosť a agregáciu buniek v oddelených bunkách IEC-18 prostredníctvom signálnych dráh sprostredkovaných cAMP. Táto ochrana pred anoikis súvisí s aktiváciou adenylátcyklázy a proteínkinázy A (PKA), čím sa zvyšuje adhézia a životaschopnosť buniek aj v pozastavených stavoch. Takéto zistenia sú významné pre pochopenie procesov súvisiacich so zápalom a potenciálnym príspevkom ku karcinogenéze v črevných tkanivách.

Okrem toho sa monovrstvy IEC-18 použili na štúdium transportu rôznych molekúl cez črevnú bariéru. V porovnaní s bunkovou líniou Caco-2 poskytujú bunky IEC-18 presnejší model pasívneho transcelulárneho a paracelulárneho transportu vďaka svojej štrukturálnej podobnosti s kryptovými bunkami tenkého čreva. Na rozdiel od buniek Caco-2, ktoré majú významné schopnosti aktívneho transportu, bunky IEC-18 vykazujú minimálny transport sprostredkovaný nosičom, čo z nich robí vhodnejšiu voľbu na analýzu pasívnej permeability hydrofilných makromolekúl.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke