IEC-18

IEC-18 rakuliin on roti peensoole krüptirakkudest saadud transformeerimata epiteelirakuliin. On näidatud, et need rakud modelleerivad tõhusalt peensoole epiteeli füsioloogilisi omadusi, eriti seoses kloriidioonide (Cl-) transpordiga. IEC-18 rakkude kloriidikanalitel on erinevad juhtimistüübid, mis reageerivad erinevatele stiimulitele, nagu rakkude paisumine, suurenenud rakusisene kaltsium (Ca²⁺) ja suurenenud tsükliline AMP (cAMP). Näiteks iseloomustab IEC-18 rakkude paisumisega aktiveeritud Cl- voolu väljapoole suunatud rektifikatsioon ja pinge sõltumatus. Lisaks sellele ekspresseerivad IEC-18 rakud tsüstilise fibroosi transmembraanjuhtivuse regulaatori (CFTR) kanaleid, mida tõendab cAMP-aktiveeritud Cl-juhtivuse olemasolu, mida saab inhibeerida glibenklamiidi ja 5-nitro-2-(3-fenüülpropüülamino)bensoehappe (NPPB) abil, kuid mida ei mõjuta DIDS.

IEC-18 rakke on kasutatud ka rakkude ellujäämismehhanismide uurimiseks detachment-indutseeritud stressi, nn anoikis, all. Uuringud näitavad, et prostaglandiin E2 (PGE2) võib edendada rakkude elujõulisust ja agregatsiooni IEC-18 rakkudes eraldunud rakkude puhul cAMP-vahendatud signaaliradade kaudu. See kaitse anoikise eest on seotud adenülaatsüklaasi ja proteiinkinaas A (PKA) aktiveerimisega, mis suurendab rakkude adhesiivsust ja elujõulisust isegi peatatud olekus. Sellised leiud on olulised, et mõista põletikuga seotud protsesse ja võimalikku panust kantserogeneesile soolestiku kudedes.

Lisaks on IEC-18 monokihti kasutatud erinevate molekulide transpordi uurimiseks läbi soolebarjääri. Võrreldes Caco-2 rakuliiniga pakuvad IEC-18 rakud täpsemat mudelit passiivse transsellulaarse ja paratsellulaarse transpordi jaoks, kuna nad on struktuuriliselt sarnased peensoole krüptirakkudega. Erinevalt Caco-2 rakkudest, millel on märkimisväärne aktiivne transpordivõime, näitavad IEC-18 rakud minimaalset kandevahendatud transporti, mistõttu on nad sobivam valik hüdrofiilsete makromolekulide passiivse läbilaskvuse analüüsimiseks.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest