- Tissue
- מעי דק, מעי עקום
- Disease
- רגיל
- Synonyms
- IEC 18, IEC18, Intestinal Epithelioid Cell line No. 18
Documents
IEC-18
Cell line · Product number 305302
01General information
- Description
קו התאים IEC-18 הוא קו תאים אפיתל לא-מומר שמקורו בתאי הקריפטות של המעי הדק של חולדות. תאים אלה הוכחו כמודל יעיל לתכונות הפיזיולוגיות של אפיתל המעי הדק, במיוחד בכל הקשור להובלת יוני כלוריד (Cl⁻). ערוצי כלוריד בתאי IEC-18 מציגים סוגים שונים של מוליכות המגיבים לגירויים שונים, כגון נפיחות תאים, עלייה ברמת הסידן התאי (Ca²⁺) ועלייה ברמת ה-AMP המחזורי (cAMP). לדוגמה, זרמי Cl⁻ המופעלים על ידי נפיחות בתאי IEC-18 מאופיינים בתיקון כלפי חוץ ובעצמאות מתח. יתר על כן, תאי IEC-18 מבטאים תעלות CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator), כפי שמעידה נוכחות מוליכות Cl⁻ המופעלת על ידי cAMP, אשר ניתנת לעיכוב על ידי גליבנקלמיד וחומצה בנזואית 5-ניטרו-2-(3-פנילפרופילאמינו) (NPPB), אך אינה מושפעת מ-DIDS.
תאי IEC-18 שימשו גם לחקר מנגנוני הישרדות תאים תחת לחץ הנגרם מניתוק, המכונה אנואיקיס. מחקרים מצביעים על כך שהפרוסטגלנדין E2 (PGE2) יכול לקדם את חיוניות התאים ואת הצטברותם בתאי IEC-18 מנותקים באמצעות מסלולי איתות המתווכים על ידי cAMP. הגנה זו מפני אנואיקיס קשורה להפעלת אדנילט ציקלאז וקינאז חלבון A (PKA), המשפרים את הידבקות התאים ואת חיוניותם גם במצבים של השעיה. ממצאים אלה חשובים להבנת תהליכים הקשורים לדלקת ותרומתם הפוטנציאלית לקרצינוגנזה ברקמות המעי.
יתר על כן, שכבות חד-תאיות של IEC-18 שימשו לחקר הובלת מולקולות שונות דרך מחסום המעי. בהשוואה לקו התאים Caco-2, תאי IEC-18 מספקים מודל מדויק יותר להעברה פסיבית בין-תאית ובין-תאית בשל הדמיון המבני שלהם לתאי הקריפטות במעי הדק. בניגוד לתאי Caco-2, בעלי יכולות העברה אקטיביות משמעותיות, תאי IEC-18 מפגינים העברה מינימלית בתיווך נשא, מה שהופך אותם לבחירה מתאימה יותר לניתוח החדירות הפסיבית של מקרומולקולות הידרופיליות.
- Tissue
- מעי דק, מעי עקום
- Disease
- רגיל
- Synonyms
- IEC 18
- IEC18
- Intestinal Epithelioid Cell line No. 18
02Classification
- Organism
- Rat
- Sex
- Unspecified
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Cell type
- תא אפיתל
04Identifiers
- Citation
- IEC-18 (מספר קטלוגי Cytion 305302)
- NCBI TaxID
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0342
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 2 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- פעמיים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Breed / subspecies
- צ'ארלס ריבר ספראג דוולי (CD(SD))
- Donor age
- 18-24 ימים
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
09Product details
- Composition table