IEC-18

La línea celular IEC-18 es una línea celular epitelial no transformada derivada de las células de la cripta del intestino delgado de rata. Se ha demostrado que estas células modelan eficazmente las propiedades fisiológicas del epitelio del intestino delgado, en particular con respecto al transporte de iones cloruro (Cl-). Los canales de cloruro de las células IEC-18 presentan distintos tipos de conductancias que responden a diversos estímulos, como la hinchazón celular, el aumento del calcio intracelular (Ca²⁺) y la elevación del AMP cíclico (AMPc). Por ejemplo, las corrientes de Cl- activadas por la hinchazón en las células IEC-18 se caracterizan por la rectificación hacia el exterior y la independencia del voltaje. Además, las células IEC-18 expresan canales reguladores de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística (CFTR), lo que se evidencia por la presencia de conductancia Cl- activada por AMPc, que puede inhibirse con glibenclamida y ácido 5-nitro-2-(3-fenilpropilamino) benzoico (NPPB), pero no se ve afectada por DIDS.

Las células IEC-18 también se han utilizado para explorar los mecanismos de supervivencia celular bajo el estrés inducido por el desprendimiento, conocido como anoikis. Las investigaciones indican que la prostaglandina E2 (PGE2) puede promover la viabilidad y la agregación celular en células IEC-18 desprendidas a través de vías de señalización mediadas por AMPc. Esta protección frente a la anoikis está asociada a la activación de la adenilato ciclasa y la proteína cinasa A (PKA), lo que mejora la adhesión y la viabilidad celular incluso en estados de suspensión. Estos hallazgos son importantes para comprender los procesos relacionados con la inflamación y su posible contribución a la carcinogénesis en los tejidos intestinales.

Además, las monocapas IEC-18 se han empleado para estudiar el transporte de diversas moléculas a través de la barrera intestinal. En comparación con la línea celular Caco-2, las células IEC-18 proporcionan un modelo más preciso para el transporte transcelular y paracelular pasivo debido a sus similitudes estructurales con las células de las criptas del intestino delgado. A diferencia de las células Caco-2, que poseen importantes capacidades de transporte activo, las células IEC-18 demuestran un transporte mínimo mediado por portadores, lo que las convierte en una opción más adecuada para analizar la permeabilidad pasiva de macromoléculas hidrofílicas.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía