IEC-18

Garis sel IEC-18 adalah garis sel epitel yang tidak berubah yang berasal dari sel crypt usus kecil tikus. Sel-sel ini telah terbukti secara efektif memodelkan sifat fisiologis epitel usus halus, khususnya yang berkaitan dengan transportasi ion klorida (Cl-). Saluran klorida dalam sel IEC-18 menunjukkan jenis konduktansi yang berbeda yang merespons berbagai rangsangan seperti pembengkakan sel, peningkatan kalsium intraseluler (Ca²⁺), dan peningkatan AMP siklik (cAMP). Sebagai contoh, arus Cl yang diaktifkan oleh pembengkakan pada sel IEC-18 ditandai dengan rektifikasi ke luar dan independensi tegangan. Selain itu, sel IEC-18 mengekspresikan saluran regulator konduktansi transmembran fibrosis kistik (CFTR), dibuktikan dengan adanya konduktansi Cl yang diaktifkan cAMP yang dapat dihambat oleh glibenklamid dan asam benzoat 5-nitro-2- (3-fenilpropilamino) (NPPB), tetapi tidak terpengaruh oleh DIDS.

Sel IEC-18 juga telah digunakan untuk mengeksplorasi mekanisme kelangsungan hidup sel di bawah stres yang diinduksi pelepasan, yang dikenal sebagai anoikis. Penelitian menunjukkan bahwa prostaglandin E2 (PGE2) dapat meningkatkan kelangsungan hidup dan agregasi sel dalam sel IEC-18 yang terlepas melalui jalur pensinyalan yang dimediasi oleh cAMP. Perlindungan dari anoikis ini dikaitkan dengan aktivasi adenilat siklase dan protein kinase A (PKA), meningkatkan adhesi dan viabilitas sel bahkan dalam keadaan tersuspensi. Temuan ini penting untuk memahami proses yang berhubungan dengan peradangan dan potensi kontribusi terhadap karsinogenesis pada jaringan usus.

Lebih jauh lagi, monolayer IEC-18 telah digunakan untuk mempelajari pengangkutan berbagai molekul melintasi sawar usus. Dibandingkan dengan garis sel Caco-2, sel IEC-18 memberikan model yang lebih akurat untuk transpor transseluler dan paraseluler pasif karena kemiripan strukturalnya dengan sel crypt usus kecil. Tidak seperti sel Caco-2, yang memiliki kemampuan transpor aktif yang signifikan, sel IEC-18 menunjukkan transpor yang dimediasi oleh pembawa minimal, menjadikannya pilihan yang lebih cocok untuk menganalisis permeabilitas pasif makromolekul hidrofilik.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami