IEC-18

Клітинна лінія IEC-18 - це нетрансформована епітеліальна клітинна лінія, отримана з криптових клітин тонкої кишки щурів. Доведено, що ці клітини ефективно моделюють фізіологічні властивості епітелію тонкої кишки, зокрема, щодо транспорту хлорид-іонів (Cl-). Хлоридні канали в клітинах IEC-18 демонструють різні типи провідності, які реагують на різні стимули, такі як набухання клітин, збільшення внутрішньоклітинного кальцію (Ca²⁺) та підвищення рівня циклічного АМФ (цАМФ). Наприклад, активовані набуханням Cl-струми в клітинах IEC-18 характеризуються зовнішнім випрямленням і незалежністю від напруги. Крім того, клітини IEC-18 експресують канали трансмембранного регулятора провідності муковісцидозу (CFTR), про що свідчить наявність активованого цАМФ Cl-струму, який може бути пригнічений глібенкламідом і 5-нітро-2-(3-фенілпропіламіно) бензойною кислотою (NPPB), але на який не впливає DIDS.

Клітини IEC-18 також використовували для вивчення механізмів виживання клітин в умовах стресу, спричиненого відшаруванням, відомого як анокіс. Дослідження показують, що простагландин Е2 (PGE2) може сприяти життєздатності та агрегації клітин у відокремлених клітинах IEC-18 через цАМФ-опосередковані сигнальні шляхи. Цей захист від аноікісу пов'язаний з активацією аденілатциклази та протеїнкінази А (PKA), що посилює адгезію та життєздатність клітин навіть у підвішеному стані. Такі результати є важливими для розуміння процесів, пов'язаних із запаленням, та потенційного внеску в канцерогенез у тканинах кишечника.

Крім того, моношари IEC-18 були використані для вивчення транспорту різних молекул через кишковий бар'єр. Порівняно з клітинною лінією Caco-2, клітини IEC-18 є більш точною моделлю пасивного трансклітинного та парацелюлярного транспорту завдяки своїй структурній подібності до криптових клітин тонкої кишки. На відміну від клітин Caco-2, які володіють значними можливостями активного транспорту, клітини IEC-18 демонструють мінімальний транспорт, опосередкований переносником, що робить їх більш підходящим вибором для аналізу пасивної проникності гідрофільних макромолекул.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>