IEC-18

Celična linija IEC-18 je netransformirana epitelijska celična linija, pridobljena iz kriptnih celic tankega črevesa podgan. Pokazalo se je, da te celice učinkovito modelirajo fiziološke lastnosti epitelija tankega črevesa, zlasti glede prenosa kloridnih ionov (Cl-). Kloridni kanali v celicah IEC-18 kažejo različne vrste prevodnosti, ki se odzivajo na različne dražljaje, kot so nabrekanje celic, povečan znotrajcelični kalcij (Ca²⁺) in povišan ciklični AMP (cAMP). Za tokove Cl- v celicah IEC-18, ki se aktivirajo z nabrekanjem, je na primer značilna usmerjenost navzven in napetostna neodvisnost. Poleg tega celice IEC-18 izražajo kanale regulatorja transmembranske prevodnosti cistične fibroze (CFTR), kar dokazuje prisotnost s cAMP aktivirane Cl-prevodnosti, ki jo lahko zavirata glibenklamid in 5-nitro-2-(3-fenilpropilamino) benzojska kislina (NPPB), vendar nanjo ne vpliva DIDS.

Celice IEC-18 so bile uporabljene tudi za raziskovanje mehanizmov preživetja celic pri stresu, ki ga povzroča odtrganje, znanem kot anoikis. Raziskave kažejo, da lahko prostaglandin E2 (PGE2) prek signalnih poti, ki jih posreduje cAMP, spodbuja preživetje in združevanje celic v odlepljenih celicah IEC-18. Ta zaščita pred anoikisom je povezana z aktivacijo adenilat ciklaze in proteinske kinaze A (PKA), kar poveča adhezijo in viabilnost celic tudi v suspendiranih stanjih. Takšne ugotovitve so pomembne za razumevanje procesov, povezanih z vnetjem, in morebitnega prispevka h karcinogenezi v črevesnih tkivih.

Poleg tega smo monosloje IEC-18 uporabili za preučevanje prenosa različnih molekul prek črevesne pregrade. V primerjavi s celično linijo Caco-2 so celice IEC-18 zaradi strukturne podobnosti s kriptnimi celicami tankega črevesa natančnejši model za pasivni transcelularni in paracelularni transport. V nasprotju s celicami Caco-2, ki imajo precejšnjo sposobnost aktivnega transporta, celice IEC-18 izkazujejo minimalen transport, posredovan s prenašalci, zato so primernejše za analizo pasivne prepustnosti hidrofilnih makromolekul.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo