IEC-18

La línea celular IEC-18 es una línea celular epitelial no transformada derivada de las células de las criptas del intestino delgado de la rata. Se ha demostrado que estas células reproducen eficazmente las propiedades fisiológicas del epitelio del intestino delgado, particularmente en lo que respecta al transporte de iones cloruro (Cl⁻). Los canales de cloruro en las células IEC-18 presentan distintos tipos de conductancias que responden a diversos estímulos, tales como la hinchazón celular, el aumento del calcio intracelular (Ca²⁺) y los niveles elevados de AMP cíclico (cAMP). Por ejemplo, las corrientes de Cl⁻ activadas por la hinchazón en las células IEC-18 se caracterizan por una rectificación hacia afuera y por su independencia del voltaje. Además, las células IEC-18 expresan canales del regulador de conductancia transmembrana de la fibrosis quística (CFTR), lo que se evidencia por la presencia de una conductancia de Cl⁻ activada por AMP cíclico, la cual puede ser inhibida por la glibenclamida y el ácido 5-nitro-2-(3-fenilpropilamino)benzoico (NPPB), pero no se ve afectada por el DIDS.

Las células IEC-18 también se han utilizado para explorar los mecanismos de supervivencia celular bajo estrés inducido por el desprendimiento, conocido como anoikis. Las investigaciones indican que la prostaglandina E2 (PGE2) puede promover la viabilidad y la agregación celular en células IEC-18 desprendidas a través de vías de señalización mediadas por AMPc. Esta protección contra el anoikis está asociada con la activación de la adenilato ciclasa y la proteína quinasa A (PKA), lo que mejora la adhesión y la viabilidad celular incluso en estado de suspensión. Estos hallazgos son importantes para comprender los procesos relacionados con la inflamación y sus posibles contribuciones a la carcinogénesis en los tejidos intestinales.

Además, se han utilizado monocapas de IEC-18 para estudiar el transporte de diversas moléculas a través de la barrera intestinal. En comparación con la línea celular Caco-2, las células IEC-18 proporcionan un modelo más preciso para el transporte transcelular y paracelular pasivo debido a sus similitudes estructurales con las células de las criptas del intestino delgado. A diferencia de las células Caco-2, que poseen importantes capacidades de transporte activo, las células IEC-18 muestran un transporte mediado por transportadores mínimo, lo que las convierte en una opción más adecuada para analizar la permeabilidad pasiva de macromoléculas hidrofílicas.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.