IEC-18

Buněčná linie IEC-18 je netransformovaná epiteliální buněčná linie odvozená z kryptových buněk tenkého střeva potkana. Bylo prokázáno, že tyto buňky účinně modelují fyziologické vlastnosti epitelu tenkého střeva, zejména pokud jde o transport chloridových iontů (Cl-). Chloridové kanály v buňkách IEC-18 vykazují odlišné typy vodivosti, které reagují na různé podněty, jako je otok buněk, zvýšené množství intracelulárního vápníku (Ca²⁺) a zvýšené množství cyklického AMP (cAMP). Například Cl- proudy aktivované otokem v buňkách IEC-18 se vyznačují rektifikací směrem ven a napěťovou nezávislostí. Buňky IEC-18 navíc exprimují kanály CFTR (cystická fibróza - regulátor transmembránové vodivosti), o čemž svědčí přítomnost Cl-vodivosti aktivované cAMP, kterou lze inhibovat glibenklamidem a 5-nitro-2-(3-fenylpropylamino)benzoovou kyselinou (NPPB), ale neovlivňuje ji DIDS.

Buňky IEC-18 byly rovněž použity ke zkoumání mechanismů přežití buněk při stresu vyvolaném oddělením, známém jako anoikis. Výzkum naznačuje, že prostaglandin E2 (PGE2) může podporovat životaschopnost a agregaci buněk v oddělených buňkách IEC-18 prostřednictvím signálních drah zprostředkovaných cAMP. Tato ochrana před anoikis je spojena s aktivací adenylátcyklázy a proteinkinázy A (PKA), což zvyšuje adhezi a životaschopnost buněk i v pozastaveném stavu. Tato zjištění jsou významná pro pochopení procesů souvisejících se zánětem a potenciálního příspěvku ke karcinogenezi ve střevních tkáních.

Dále byly monovrstvy IEC-18 použity ke studiu transportu různých molekul přes střevní bariéru. Ve srovnání s buněčnou linií Caco-2 poskytují buňky IEC-18 přesnější model pasivního transcelulárního a paracelulárního transportu díky své strukturální podobnosti s kryptovými buňkami tenkého střeva. Na rozdíl od buněk Caco-2, které mají významné aktivní transportní schopnosti, vykazují buňky IEC-18 minimální transport zprostředkovaný nosiči, což z nich činí vhodnější volbu pro analýzu pasivní propustnosti hydrofilních makromolekul.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení