IEC-18

IEC-18 細胞系是一種源自大鼠小腸隱窩細胞的非轉化上皮細胞系。研究顯示，這些細胞能有效模擬小腸上皮的生理特性，特別是在氯離子（Cl⁻）轉運方面。 IEC-18 細胞中的氯離子通道會展現出不同類型的導電性，並對各種刺激（例如細胞腫脹、細胞內鈣離子 (Ca²⁺) 濃度升高以及環磷酸腺苷 (cAMP) 濃度升高）作出反應。舉例來說，IEC-18 細胞中由腫脹激活的 Cl⁻ 電流具有外向整流及電壓不依賴性的特徵。 此外，IEC-18 細胞表達囊性纖維化跨膜傳導調節蛋白（CFTR）通道， 這點可從其存在環磷酸腺苷（cAMP）激活的 Cl⁻ 導電性得到證實，該導電性可被格列本脲和 5-硝基-2-(3-苯基丙基氨基)苯甲酸（NPPB）抑制，但不受 DIDS 影響。

IEC-18 細胞亦被用於探索在脫附誘導壓力（即「脫附凋亡」）下的細胞存活機制。研究指出，前列腺素 E2（PGE2）可透過 cAMP 介導的訊號傳導途徑，促進脫附狀態下 IEC-18 細胞的存活率與聚集能力。 這種對「脫附性細胞死亡」的保護作用與腺苷酸環化酶及蛋白激酶 A（PKA）的活化有關，即使在懸浮狀態下，也能增強細胞黏附與存活率。這些發現對於理解與發炎相關的過程，以及其對腸道組織致癌作用的潛在貢獻，具有重要意義。

此外，IEC-18 單層細胞已被用於研究各種分子穿越腸道屏障的轉運過程。相較於 Caco-2 細胞系，由於 IEC-18 細胞與小腸隱窩細胞在結構上較為相似，因此能提供更精確的被動跨細胞及旁細胞轉運模型。 與具備顯著主動轉運能力的 Caco-2 細胞不同，IEC-18 細胞展現出極少的載體介導轉運，使其成為分析親水性大分子被動滲透性的更合適選擇。

37°C，5% CO_₂，加濕環境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。

詳情請參閱我們的 《保固聲明》。