IEC-18

IEC-18 hücre hattı, sıçan ince bağırsağının kript hücrelerinden türetilen, transformasyona uğramamış bir epitel hücre hattıdır. Bu hücrelerin, özellikle klorür iyonu (Cl-) taşınması açısından ince bağırsak epitelinin fizyolojik özelliklerini etkili bir şekilde modellediği gösterilmiştir. IEC-18 hücrelerindeki klorür kanalları, hücre şişmesi, hücre içi kalsiyum artışı (Ca²⁺) ve yüksek siklik AMP (cAMP) gibi çeşitli uyaranlara yanıt veren farklı iletkenlik türleri sergiler. Örneğin, IEC-18 hücrelerindeki şişme ile aktive olan Cl- akımları, dışa doğru düzeltme ve voltaj bağımsızlığı ile karakterize edilir. Ayrıca IEC-18 hücreleri, glibenklamid ve 5-nitro-2-(3-phenylpropylamino) benzoik asit (NPPB) tarafından inhibe edilebilen ancak DIDS'ten etkilenmeyen cAMP ile aktive edilen Cl- iletkenliğinin varlığıyla kanıtlanan kistik fibroz transmembran iletkenlik düzenleyici (CFTR) kanallarını ifade eder.

IEC-18 hücreleri ayrıca anoikis olarak bilinen ayrılma kaynaklı stres altında hücre hayatta kalma mekanizmalarını araştırmak için de kullanılmıştır. Araştırmalar, prostaglandin E2'nin (PGE2), cAMP aracılı sinyal yolları yoluyla ayrılmış IEC-18 hücrelerinde hücre canlılığını ve toplanmasını teşvik edebileceğini göstermektedir. Anoikise karşı bu koruma, adenilat siklaz ve protein kinaz A'nın (PKA) aktivasyonu ile ilişkilidir ve askıya alınmış durumlarda bile hücre yapışmasını ve canlılığını artırır. Bu bulgular, enflamasyonla ilgili süreçlerin ve bağırsak dokularındaki karsinogeneze potansiyel katkıların anlaşılması açısından önemlidir.

Ayrıca, IEC-18 tek tabakaları çeşitli moleküllerin bağırsak bariyeri boyunca taşınmasını incelemek için kullanılmıştır. Caco-2 hücre hattı ile karşılaştırıldığında IEC-18 hücreleri, ince bağırsak kript hücrelerine yapısal benzerlikleri nedeniyle pasif transselüler ve paraselüler taşıma için daha doğru bir model sağlar. Önemli aktif taşıma yeteneklerine sahip olan Caco-2 hücrelerinin aksine, IEC-18 hücreleri minimum taşıyıcı aracılı taşıma gösterir ve bu da onları hidrofilik makromoleküllerin pasif geçirgenliğini analiz etmek için daha uygun bir seçim haline getirir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın