IEC-18

La lignée cellulaire IEC-18 est une lignée de cellules épithéliales non transformées dérivée des cellules des cryptes de l’intestin grêle du rat. Il a été démontré que ces cellules reproduisent efficacement les propriétés physiologiques de l’épithélium de l’intestin grêle, notamment en ce qui concerne le transport des ions chlorure (Cl⁻). Les canaux chlorure des cellules IEC-18 présentent différents types de conductances qui réagissent à divers stimuli, tels que le gonflement cellulaire, l’augmentation du calcium intracellulaire (Ca²⁺) et l’élévation de l’AMP cyclique (AMPc). Par exemple, les courants de Cl⁻ activés par le gonflement dans les cellules IEC-18 se caractérisent par une rectification vers l’extérieur et une indépendance vis-à-vis de la tension. De plus, les cellules IEC-18 expriment des canaux du régulateur de conductance transmembranaire de la fibrose kystique (CFTR), comme en témoigne la présence d’une conductance de Cl⁻ activée par l’AMP cyclique, qui peut être inhibée par la glibenclamide et l’acide 5-nitro-2-(3-phénylpropylamino)benzoïque (NPPB), mais qui n’est pas affectée par le DIDS.

Les cellules IEC-18 ont également été utilisées pour étudier les mécanismes de survie cellulaire sous l’effet d’un stress induit par le détachement, connu sous le nom d’anoïkise. Les recherches indiquent que la prostaglandine E2 (PGE2) peut favoriser la viabilité et l’agrégation des cellules IEC-18 détachées par le biais de voies de signalisation médiées par l’AMPc. Cette protection contre l’anoïkis est associée à l’activation de l’adénylate cyclase et de la protéine kinase A (PKA), ce qui renforce l’adhésion et la viabilité cellulaires, même à l’état en suspension. Ces résultats sont importants pour comprendre les processus liés à l’inflammation et leur contribution potentielle à la carcinogenèse dans les tissus intestinaux.

De plus, des monocouches d’IEC-18 ont été utilisées pour étudier le transport de diverses molécules à travers la barrière intestinale. Comparativement à la lignée cellulaire Caco-2, les cellules IEC-18 constituent un modèle plus précis pour le transport transcellulaire et paracellulaire passif en raison de leurs similitudes structurelles avec les cellules des cryptes de l’intestin grêle. Contrairement aux cellules Caco-2, qui possèdent d’importantes capacités de transport actif, les cellules IEC-18 ne présentent qu’un transport minimal médié par des transporteurs, ce qui en fait un choix plus approprié pour analyser la perméabilité passive des macromolécules hydrophiles.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.