IEC-18

IEC-18-solulinja on muuntumaton epiteelisolulinja, joka on peräisin rotan ohutsuolen kryptasoluista. Näiden solujen on osoitettu mallintavan tehokkaasti ohutsuolen epiteelin fysiologisia ominaisuuksia, erityisesti kloridi-ionien (Cl-) kuljetuksen osalta. IEC-18-solujen kloridikanavilla on erityyppisiä konduktansseja, jotka reagoivat erilaisiin ärsykkeisiin, kuten solun turvotukseen, lisääntyneeseen solunsisäiseen kalsiumiin (Ca²⁺) ja kohonneeseen sykliseen AMP:hen (cAMP). Esimerkiksi IEC-18-solujen turvotuksen aktivoimille Cl-virroille on ominaista ulospäin suuntautuva oikaisu ja jännitteestä riippumattomuus. Lisäksi IEC-18-solut ilmentävät CFTR-kanavia (cystic fibrosis transmembrane conductance regulator), mistä on osoituksena cAMP-aktivoitu Cl-johtavuus, jota voidaan estää glibenklamidilla ja 5-nitro-2-(3-fenyylipropyyliamino)bentsoehapolla (NPPB), mutta johon DIDS ei vaikuta.

IEC-18-soluja on käytetty myös solujen selviytymismekanismien tutkimiseen irtoamisen aiheuttamassa stressissä, joka tunnetaan nimellä anoikis. Tutkimukset osoittavat, että prostaglandiini E2 (PGE2) voi edistää solujen elinkelpoisuutta ja aggregaatiota irronneissa IEC-18-soluissa cAMP-välitteisten signaalireittien kautta. Tämä suoja anoikisilta liittyy adenylaattisyklaasin ja proteiinikinaasi A:n (PKA) aktivoitumiseen, mikä parantaa solujen adheesiota ja elinkelpoisuutta myös suspendoituneissa tiloissa. Tällaiset havainnot ovat merkittäviä, kun halutaan ymmärtää tulehdukseen liittyviä prosesseja ja niiden mahdollista vaikutusta karsinogeneesiin suolistokudoksissa.

Lisäksi IEC-18-monolayerejä on käytetty erilaisten molekyylien kulkeutumisen tutkimiseen suolistoesteen läpi. Verrattuna Caco-2-solulinjaan IEC-18-solut tarjoavat tarkemman mallin passiiviselle transsellulaariselle ja parasellulaariselle kulkeutumiselle, koska ne ovat rakenteellisesti samankaltaisia kuin ohutsuolen kryptasolut. Toisin kuin Caco-2-soluilla, joilla on huomattavat aktiiviset kuljetuskyvyt, IEC-18-soluilla on minimaalinen kantaja-välitteinen kuljetus, joten ne ovat sopivampi valinta hydrofiilisten makromolekyylien passiivisen läpäisevyyden analysoimiseksi.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa