Aller directement au contenu
Kera-308
Tissu
Peau
Maladie
Papillome de la peau de la souris
Synonymes
KERA-308, 308, Line 308

Documents

Kera-308

Cell line · Référence du produit 400429

The Kera-308 cell line, established from adult mouse skin keratinocytes, offers a versatile model for studying the intricate processes of skin physiology,...

€800.00hors taxes et frais de port
En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire Kera-308, établie à partir de kératinocytes de peau de souris adulte, offre un modèle polyvalent pour l'étude des processus complexes de la physiologie de la peau, en particulier la cicatrisation des plaies et la fonction des kératinocytes. Cette lignée cellulaire démontre une capacité remarquable à réguler à la hausse l'expression de la kératine, y compris les types de kératine induits par la blessure tels que Krt6a, dans des conditions spécifiques telles que le traitement avec l'extrait de racine de Morus alba. La réactivité des cellules Kera-308 au phorbol 12-myristate 13-acétate (PMA) souligne leur utilité dans l'étude des mécanismes cellulaires qui sous-tendent la réparation et la régénération de la peau.

Les cellules Kera-308 se distinguent par leur réponse à la prolifération en fonction de la dose, qui peut être considérablement renforcée par des stimuli externes tels que l'extrait de racine de Morus alba. Cette caractéristique fait de Kera-308 un excellent outil pour sonder les fondements moléculaires de la prolifération et de la différenciation des kératinocytes en réponse à des agents thérapeutiques.

En outre, le profil transcriptionnel des cellules Kera-308 dans les scénarios de cicatrisation, en particulier leur filament de kératine et la signalisation CXCL12/CXCR4, fournit des informations précieuses sur les dynamiques cellulaires et moléculaires en jeu lors de la réparation de la peau. L'implication de ces voies de signalisation souligne l'importance des cellules Kera-308 dans l'exploration de nouvelles stratégies thérapeutiques pour améliorer la cicatrisation des plaies et traiter les maladies de la peau.

Tissu
Peau
Maladie
Papillome de la peau de la souris
Synonymes
  • KERA-308
  • 308
  • Line 308

02Classification

Organisme
Souris
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Type de cellule
Kératinocyte

04Identifiants

Référence
Kera-308 (numéro de catalogue Cytion 400429)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5782

05Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
TrypLE Express (Life Technologies)
Repiquage
Retirer le milieu et rincer les cellules adhérentes à l'aide de PBS sans calcium ni magnésium (3-5 ml de PBS pour T25, 5-10 ml pour les flacons de culture cellulaire T75). Ajouter Tryple Express (1-2 ml par T25, 2,5 ml par flacon de culture cellulaire T75), la feuille de cellules doit être complètement recouverte. Incuber à 37 degrés pendant 15 minutes. Remettre soigneusement les cellules en suspension avec 10 ml de milieu (utiliser un grattoir à cellules si nécessaire), centrifuger pendant 5 minutes à 300xg, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les répartir dans de nouveaux flacons contenant du milieu frais.
Densité de semis
1 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Race / sous-espèce
BALB/c