Siirry sisältöön
Kera-308
Kudos
Iho
Sairaus
Hiiren ihon papillooma
Synonyymit
KERA-308, 308, Line 308

Asiakirjat

Kera-308

Cell line · Tuotenumero 400429

The Kera-308 cell line, established from adult mouse skin keratinocytes, offers a versatile model for studying the intricate processes of skin physiology,...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Kera-308-solulinja, joka on luotu aikuisen hiiren ihon keratinosyyteistä, tarjoaa monipuolisen mallin ihon fysiologian monimutkaisten prosessien, erityisesti haavan paranemisen ja keratinosyyttien toiminnan tutkimiseen. Tämä solulinja osoittaa huomattavaa kykyä säädellä keratiinin ilmentymistä, mukaan lukien haavan aiheuttamat keratiinityypit, kuten Krt6a, erityisolosuhteissa, kuten Morus alba -juuren uutteella hoidettaessa. Kera-308-solujen reagointikyky forboli-12-myristaatti-13-asetaattiin (PMA) korostaa niiden hyödyllisyyttä ihon korjauksen ja uudistumisen taustalla olevien solumekanismien tutkimisessa.

Kera-308-solujen erityispiirre on niiden annosriippuvainen proliferaatiovaste, jota voidaan merkittävästi lisätä ulkoisilla ärsykkeillä, kuten Morus alba -juuren uutteella. Tämä ominaisuus tekee Kera-308-soluista erinomaisen välineen keratinosyyttien proliferaation ja erilaistumisen molekulaaristen taustatekijöiden tutkimiseen terapeuttisten aineiden vaikutuksesta.

Lisäksi Kera-308-solujen transkriptioprofiili haavanparantamistilanteissa, erityisesti niiden säännelty keratiinifilamentti ja CXCL12/CXCR4-signalointi, tarjoaa arvokasta tietoa solu- ja molekyylidynamiikasta ihon korjauksen aikana. Näiden signaalireittien osallistuminen korostaa Kera-308-solujen merkitystä tutkittaessa uusia terapeuttisia strategioita haavan paranemisen tehostamiseksi ja ihosairauksien hoitamiseksi.

Kudos
Iho
Sairaus
Hiiren ihon papillooma
Synonyymit
  • KERA-308
  • 308
  • Line 308

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Solutyyppi
Keratinosyytit

04Tunnisteet

Lähdeviite
Kera-308 (Cytionin luettelonumero 400429)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_5782

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
TrypLE Express (Life Technologies)
Soluviljely
Poista väliaine ja huuhtele kiinni olevat solut PBS:llä, jossa ei ole kalsiumia ja magnesiumia (3-5 ml PBS:ää T25-soluviljelypulloissa, 5-10 ml T75-soluviljelypulloissa). Lisää Tryple Express (1-2 ml T25-soluviljelypulloa kohti, 2,5 ml T75-soluviljelypulloa kohti), solulevyn on peitettävä kokonaan. Inkuboidaan 37 asteessa 15 minuuttia. Suspensioi solut varovasti uudelleen 10 ml:lla elatusainetta (käytä tarvittaessa solukaavinta), sentrifugoi 5 minuuttia 300xg:n nopeudella, suspensioi solut uudelleen tuoreeseen elatusaineeseen ja annostele ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät tuoretta elatusainetta.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Rotua / alalajia
BALB/c