Pāriet uz saturu
Kera-308
Audums
Āda
Slimība
Peles ādas papiloma
Sinonīmi
KERA-308, 308, Line 308

Dokumenti

Kera-308

Cell line · Preces numurs 400429

The Kera-308 cell line, established from adult mouse skin keratinocytes, offers a versatile model for studying the intricate processes of skin physiology,...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Kera-308 šūnu līnija, kas izveidota no pieaugušu peļu ādas keratinocītiem, ir daudzpusīgs modelis sarežģītu ādas fizioloģijas procesu, jo īpaši brūču dzīšanas un keratinocītu funkciju, izpētei. Šai šūnu līnijai piemīt ievērojama spēja paaugstināt keratīna ekspresiju, tostarp brūču izraisītu keratīna tipu, piemēram, Krt6a, īpašos apstākļos, piemēram, apstrādājot ar Morus alba saknes ekstraktu. Kera-308 šūnu spēja reaģēt uz phhorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) izceļ to lietderību, pētot šūnu mehānismus, kas ir ādas atjaunošanās un reģenerācijas pamatā.

Kera-308 šūnu izcilā īpašība ir no devas atkarīgā proliferācijas reakcija, ko var ievērojami pastiprināt ar ārējiem stimuliem, piemēram, Morus alba saknes ekstraktu. Šī īpašība padara Kera-308 par lielisku līdzekli keratinocītu proliferācijas un diferenciācijas molekulāro pamatu izpētei, reaģējot uz terapeitiskiem līdzekļiem.

Turklāt Kera-308 šūnu transkripcijas profils brūču dzīšanas scenārijos, jo īpaši to keratīna pavedienu un CXCL12/CXCR4 signalizācijas pastiprināšanās, sniedz nenovērtējamu ieskatu šūnu un molekulārajā dinamikā ādas atjaunošanās laikā. Šo signalizācijas ceļu iesaistīšanās uzsver Kera-308 šūnu nozīmi jaunu terapeitisko stratēģiju izpētē, lai uzlabotu brūču dzīšanu un ādas slimību ārstēšanu.

Audums
Āda
Slimība
Peles ādas papiloma
Sinonīmi
  • KERA-308
  • 308
  • Line 308

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Šūnu tips
Keratinocīti

04Identifikatori

Atsauce
Kera-308 (Cytion kataloga numurs 400429)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_5782

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
TrypLE Express (Life Technologies)
Pārstādīšana
Noņemiet barotni un izskalojiet pielipušās šūnas, izmantojot PBS bez kalcija un magnija (3-5 ml PBS T25, 5-10 ml T75 šūnu kultūru kolbām). Pievienojiet Tryple Express (1-2 ml uz T25, 2,5 ml uz T75 šūnu kultūru kolbu), šūnu sloksnei jābūt pilnībā pārklātai. 15 minūtes inkubēt 37 grādu temperatūrā. Uzmanīgi resuspendēt šūnas ar 10 ml barotnes (vajadzības gadījumā izmantot šūnu skrāpi), centrifugēt 5 minūtes ar 300xg, resuspendēt šūnas svaigā barotnē un izlietot jaunās kolbās, kurās ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Šķirne / pasuga
BALB/c