Премини към съдържанието
Kera-308
Тъкан
Кожа
Заболяване
Папилома на кожата на мишка
Синоними
KERA-308, 308, Line 308

Документи

Kera-308

Cell line · Номер на продукта 400429

The Kera-308 cell line, established from adult mouse skin keratinocytes, offers a versatile model for studying the intricate processes of skin physiology,...

€800.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия Kera-308, създадена от кератиноцити на възрастна мишка, предлага универсален модел за изучаване на сложните процеси във физиологията на кожата, по-специално заздравяването на рани и функцията на кератиноцитите. Тази клетъчна линия демонстрира забележителна способност да регулира експресията на кератини, включително на кератини, предизвикани от рани, като Krt6a, при специфични условия, като например третиране с екстракт от корен на Morus alba. Отзивчивостта на клетките Kera-308 към фосфол 12-миристат 13-ацетат (PMA) подчертава тяхната полезност за изследване на клетъчните механизми, които са в основата на възстановяването и регенерацията на кожата.

Отличителна характеристика на клетките Kera-308 е техният дозозависим отговор на пролиферация, който може да бъде значително засилен от външни стимули като екстракт от корен на Morus alba. Тази характеристика прави Kera-308 отличен инструмент за изследване на молекулярните основи на пролиферацията и диференциацията на кератиноцитите в отговор на терапевтични агенти.

Освен това транскрипционният профил на клетките Kera-308 в сценариите на заздравяване на рани, особено регулираната от тях кератинова нишка и сигнализацията CXCL12/CXCR4, осигурява безценни прозрения за клетъчната и молекулярната динамика по време на възстановяването на кожата. Участието на тези сигнални пътища подчертава значението на клетките Kera-308 за проучване на нови терапевтични стратегии за подобряване на заздравяването на рани и лечение на кожни заболявания.

Тъкан
Кожа
Заболяване
Папилома на кожата на мишка
Синоними
  • KERA-308
  • 308
  • Line 308

02Класификация

Организъм
Мишка
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Тип клетка
Кератиноцити

04Идентификатори

Източник
Kera-308 (каталожен номер 400429 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_5782

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
TrypLE Express (Life Technologies)
Пресаждане
Отстранете средата и изплакнете адхезираните клетки, като използвате PBS без калций и магнезий (3-5 ml PBS за Т25, 5-10 ml за колби за клетъчни култури Т75). Добавете Tryple Express (1-2 ml за Т25, 2,5 ml за колба за клетъчни култури Т75), като клетъчният лист трябва да бъде покрит напълно. Инкубирайте при 37 градуса за 15 минути. Внимателно ресуспендирайте клетките с 10 ml среда (ако е необходимо, използвайте клетъчна стъргалка), центрофугирайте за 5 минути при 300xg, ресуспендирайте клетките в прясна среда и разпределете в нови колби, които съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Порода / подвид
BALB/c