Gå til innholdet
Kera-308
Vev
Hud
Sykdom
Papillom i huden på mus
Synonymer
KERA-308, 308, Line 308

Dokumenter

Kera-308

Cell line · Produktnummer 400429

The Kera-308 cell line, established from adult mouse skin keratinocytes, offers a versatile model for studying the intricate processes of skin physiology,...

€800.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Kera-308-cellelinjen, som er etablert fra keratinocytter fra voksen musehud, er en allsidig modell for å studere de kompliserte prosessene i hudens fysiologi, spesielt sårheling og keratinocyttfunksjon. Denne cellelinjen viser en bemerkelsesverdig evne til å oppregulere keratinuttrykk, inkludert sårinduserte keratintyper som Krt6a, under spesifikke forhold som behandling med Morus alba-rotekstrakt. Kera-308-cellenes respons på phorbol 12-myristat 13-acetat (PMA) viser at de kan brukes til å undersøke de cellulære mekanismene som ligger til grunn for reparasjon og regenerering av huden.

Kera-308-cellene skiller seg ut ved at de har en doseavhengig proliferasjonsrespons, som kan forsterkes betydelig av ytre stimuli som Morus alba-rotekstrakt. Denne egenskapen gjør Kera-308 til et utmerket verktøy for å undersøke det molekylære grunnlaget for keratinocyttproliferasjon og -differensiering som respons på terapeutiske midler.

Dessuten gir transkripsjonsprofilen til Kera-308-celler i sårhelingsscenarier, spesielt deres oppregulerte keratinfilament- og CXCL12/CXCR4-signalering, uvurderlig innsikt i den cellulære og molekylære dynamikken som er i spill under hudreparasjon. At disse signalveiene er involvert, understreker relevansen av Kera-308-celler i utforskningen av nye terapeutiske strategier for å fremme sårheling og behandle hudlidelser.

Vev
Hud
Sykdom
Papillom i huden på mus
Synonymer
  • KERA-308
  • 308
  • Line 308

02Klassifisering

Organisme
Mus
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Celletype
Keratinocytt

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Kera-308 (Cytion katalognummer 400429)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_5782

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
TrypLE Express (Life Technologies)
Subkultivering
Fjern mediet og skyll de adherente cellene med PBS uten kalsium og magnesium (3-5 ml PBS for T25, 5-10 ml for T75-cellekulturflasker). Tilsett Tryple Express (1-2 ml per T25, 2,5 ml per T75-cellekulturkolbe), cellearket må være helt dekket. Inkuber ved 37 grader i 15 minutter. Resuspender cellene forsiktig med 10 ml medium (bruk en celleskrape om nødvendig), sentrifuger i 5 minutter ved 300xg, resuspender cellene i nytt medium og fordel dem i nye kolber som inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Rase / underart
BALB/c