Mine otse sisu juurde
Kera-308
Kude
Nahk
Haigus
Hiire naha papilloom
Sünonüümid
KERA-308, 308, Line 308

Dokumendid

Kera-308

Cell line · Toote number 400429

The Kera-308 cell line, established from adult mouse skin keratinocytes, offers a versatile model for studying the intricate processes of skin physiology,...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Kera-308 rakuliin, mis on loodud täiskasvanud hiire naha keratinotsüütidest, pakub mitmekülgset mudelit naha füsioloogia keeruliste protsesside, eriti haavade paranemise ja keratinotsüütide funktsiooni uurimiseks. See rakuliin näitab tähelepanuväärset võimet keratiini, sealhulgas haavade põhjustatud keratiini tüüpide, nagu Krt6a, ekspressiooni ülesreguleerida spetsiifilistes tingimustes, näiteks Morus alba juurte ekstraktiga töötlemisel. Kera-308 rakkude tundlikkus forbool-12-müristaat-13-atsetaadi (PMA) suhtes rõhutab nende kasulikkust naha parandamise ja taastumise aluseks olevate rakumehhanismide uurimisel.

Kera-308 rakkude silmapaistvaks omaduseks on nende annusest sõltuv proliferatsioonireaktsioon, mida saab märkimisväärselt suurendada väliste stiimulite, näiteks Morus alba juure ekstrakti abil. See omadus muudab Kera-308 suurepäraseks vahendiks keratinotsüütide proliferatsiooni ja diferentseerumise molekulaarsete aluste uurimiseks vastusena terapeutilistele ainetele.

Lisaks sellele annab Kera-308 rakkude transkriptsiooniprofiil haavaparanduse stsenaariumides, eriti nende reguleeritud keratiinifilamentide ja CXCL12/CXCR4-signalisatsioon, hindamatut teavet naha parandamise ajal toimuva rakulise ja molekulaarse dünaamika kohta. Nende signaaliradade kaasamine rõhutab Kera-308 rakkude olulisust uute ravistrateegiate uurimisel haavade paranemise tõhustamiseks ja nahahaiguste raviks.

Kude
Nahk
Haigus
Hiire naha papilloom
Sünonüümid
  • KERA-308
  • 308
  • Line 308

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Rakutüüp
Keratinotsüüdid

04Tunnused

Viide
Kera-308 (Cytioni katalooginumber 400429)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_5782

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
TrypLE Express (Life Technologies)
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage keskkond ja loputage kinni jäänud rakud kaltsiumi- ja magneesiumivaba PBS-ga (3-5 ml PBS T25 rakukultuurikolbide puhul, 5-10 ml T75 rakukultuurikolbide puhul). Lisage Tryple Express (1-2 ml T25, 2,5 ml T75 rakukultuurikolbi kohta), rakukile peab olema täielikult kaetud. Inkubeerige 37 kraadi juures 15 minutit. Resuspenseerige rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega (vajaduse korral kasutage rakukaabitsat), tsentrifuugige 5 minutit 300xg juures, resuspenseerige rakud värskes söötmes ja doseerige uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötme.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
BALB/c