الانتقال إلى المحتوى
Kera-308
الأنسجة
البشرة
المرض
الورم الحليمي في جلد الفأر
المرادفات
KERA-308, 308, Line 308

المستندات

Kera-308

Cell line · رقم المنتج 400429

The Kera-308 cell line, established from adult mouse skin keratinocytes, offers a versatile model for studying the intricate processes of skin physiology,...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

يوفر خط خلايا Kera-308، الذي تم إنشاؤه من الخلايا الكيراتينية لجلد الفأر البالغ، نموذجاً متعدد الاستخدامات لدراسة العمليات المعقدة لفسيولوجيا الجلد، وخاصةً التئام الجروح ووظيفة الخلايا الكيراتينية. يُظهر هذا الخط الخلوي قدرة ملحوظة على زيادة تنظيم التعبير الكيراتيني، بما في ذلك أنواع الكيراتين المستحثة للجروح مثل Krt6a، في ظل ظروف محددة مثل العلاج بمستخلص جذر موروس ألبا. تسلط استجابة خلايا Kera-308 لخلايا Kera-308 لفوربول 12-ميريستات 13-أسيتات (PMA) الضوء على فائدتها في دراسة الآليات الخلوية الكامنة وراء إصلاح الجلد وتجديده.

ومن السمات البارزة لخلايا كيرا-308 استجابتها للتكاثر المعتمدة على الجرعة، والتي يمكن تعزيزها بشكل كبير بواسطة محفزات خارجية مثل مستخلص جذر موروس ألبا. وتجعل هذه الخاصية من كيرا-308 أداة ممتازة لسبر الأسس الجزيئية لتكاثر الخلايا الكيراتينية وتمايزها استجابةً للعوامل العلاجية.

وعلاوة على ذلك، يوفر المظهر النسخي لخلايا كيرا-308 في سيناريوهات التئام الجروح، لا سيما خيوط الكيراتين المنظمة بشكل كبير وإشارات CXCL12/CXCR4، رؤى لا تقدر بثمن في الديناميكيات الخلوية والجزيئية التي تلعب دورًا أثناء إصلاح الجلد. ويؤكد انخراط مسارات الإشارات هذه على أهمية خلايا كيرا-308 في استكشاف استراتيجيات علاجية جديدة لتعزيز التئام الجروح وعلاج اضطرابات الجلد.

الأنسجة
البشرة
المرض
الورم الحليمي في جلد الفأر
المرادفات
  • KERA-308
  • 308
  • Line 308

02التصنيف

كائن حي
الماوس
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

نوع الخلية
الخلايا الكيراتينية

04المعرّفات

المرجع
كيرا-308 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 400429)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_5782

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
تريبلي إكسبرس (لايف تكنولوجيز)
إعادة الاستنبات
إزالة الوسط وشطف الخلايا الملتصقة باستخدام PBS بدون الكالسيوم والمغنيسيوم (3-5 مل من PBS لكل T25، 5-10 مل لقوارير زراعة الخلايا T75). أضف تريبل إكسبريس (1-2 مل لكل T25، 2.5 مل لكل قارورة زراعة خلايا T75)، يجب تغطية صفيحة الخلية بالكامل. احتضنها عند درجة حرارة 37 درجة لمدة 15 دقيقة. يُعاد غمر الخلايا بعناية بوسط 10 مل من الوسط (استخدم مكشطة الخلايا إذا لزم الأمر)، ثم يُعاد الطرد المركزي لمدة 5 دقائق عند 300xg، ويُعاد غمر الخلايا في وسط جديد ويُوزع في قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

السلالة / النوع الفرعي
بالب/ج