Μετάβαση στο περιεχόμενο
Kera-308
Ιστός
Δέρμα
Ασθένεια
Θηλώματα του δέρματος του ποντικιού
Συνώνυμα
KERA-308, 308, Line 308

Έγγραφα

Kera-308

Cell line · Αριθμός προϊόντος 400429

The Kera-308 cell line, established from adult mouse skin keratinocytes, offers a versatile model for studying the intricate processes of skin physiology,...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά Kera-308, που δημιουργήθηκε από κερατινοκύτταρα δέρματος ενήλικων ποντικών, προσφέρει ένα ευέλικτο μοντέλο για τη μελέτη των περίπλοκων διαδικασιών της φυσιολογίας του δέρματος, ιδίως της επούλωσης πληγών και της λειτουργίας των κερατινοκυττάρων. Αυτή η κυτταρική σειρά επιδεικνύει μια αξιοσημείωτη ικανότητα να ρυθμίζει την έκφραση κερατίνης, συμπεριλαμβανομένων των τύπων κερατίνης που προκαλούνται από τραύματα, όπως η Krt6a, υπό ειδικές συνθήκες, όπως η επεξεργασία με εκχύλισμα ρίζας Morus alba. Η ανταπόκριση των κυττάρων Kera-308 στη φορβόλη 12-μυριστικό 13-οξικό άλας (PMA) αναδεικνύει τη χρησιμότητά τους στη διερεύνηση των κυτταρικών μηχανισμών που διέπουν την επιδιόρθωση και την αναγέννηση του δέρματος.

Ένα ιδιαίτερο χαρακτηριστικό των κυττάρων Kera-308 είναι η δοσοεξαρτώμενη απόκριση στον πολλαπλασιασμό τους, η οποία μπορεί να ενισχυθεί σημαντικά από εξωτερικά ερεθίσματα όπως το εκχύλισμα ρίζας Morus alba. Αυτό το χαρακτηριστικό καθιστά το Kera-308 ένα εξαιρετικό εργαλείο για τη διερεύνηση των μοριακών βάσεων του πολλαπλασιασμού και της διαφοροποίησης των κερατινοκυττάρων ως απόκριση σε θεραπευτικούς παράγοντες.

Επιπλέον, το μεταγραφικό προφίλ των κυττάρων Kera-308 σε σενάρια επούλωσης τραυμάτων, ιδίως η αυξημένη ρύθμιση των νηματίων κερατίνης και η σηματοδότηση CXCL12/CXCR4, παρέχει ανεκτίμητες πληροφορίες για την κυτταρική και μοριακή δυναμική που παίζει ρόλο κατά την επιδιόρθωση του δέρματος. Η εμπλοκή αυτών των σηματοδοτικών μονοπατιών υπογραμμίζει τη σημασία των κυττάρων Kera-308 στη διερεύνηση νέων θεραπευτικών στρατηγικών για την ενίσχυση της επούλωσης τραυμάτων και τη θεραπεία δερματικών διαταραχών.

Ιστός
Δέρμα
Ασθένεια
Θηλώματα του δέρματος του ποντικιού
Συνώνυμα
  • KERA-308
  • 308
  • Line 308

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Τύπος κυττάρου
Κερατινοκύτταρα

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
Kera-308 (αριθμός καταλόγου Cytion 400429)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_5782

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
TrypLE Express (Life Technologies)
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το μέσο και ξεπλύνετε τα προσκολλημένα κύτταρα χρησιμοποιώντας PBS χωρίς ασβέστιο και μαγνήσιο (3-5 ml PBS για φιάλες κυτταροκαλλιέργειας T25, 5-10 ml για φιάλες κυτταροκαλλιέργειας T75). Προσθέστε Tryple Express (1-2 ml ανά φιάλη κυτταροκαλλιέργειας T25, 2,5 ml ανά φιάλη κυτταροκαλλιέργειας T75), το φύλλο κυττάρων πρέπει να καλυφθεί πλήρως. Επώαση στους 37 βαθμούς για 15 λεπτά. Επανασυσσωματώστε προσεκτικά τα κύτταρα με 10 ml μέσου (χρησιμοποιήστε κυτταρική ξύστρα εάν είναι απαραίτητο), φυγοκεντρίστε για 5 λεπτά στα 300xg, επανασυσσωματώστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και διανείμετε σε νέες φιάλες που περιέχουν φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Φυλή / υποείδος
BALB/c