Ga naar de inhoud
Kera-308
Weefsel
Huid
Ziekte
Papilloom van de muizenhuid
Synoniemen
KERA-308, 308, Line 308

Documenten

Kera-308

Cell line · Productnummer 400429

The Kera-308 cell line, established from adult mouse skin keratinocytes, offers a versatile model for studying the intricate processes of skin physiology,...

€800.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De Kera-308 cellijn, afkomstig van volwassen keratinocyten van muizenhuid, biedt een veelzijdig model voor het bestuderen van de ingewikkelde processen van huidfysiologie, met name wondgenezing en keratinocytenfunctie. Deze cellijn laat een opmerkelijk vermogen zien om keratine-expressie te upreguleren, inclusief wondgeïnduceerde keratinetypes zoals Krt6a, onder specifieke omstandigheden zoals behandeling met Morus alba wortelextract. De responsiviteit van Kera-308 cellen op phorbol 12-myristaat 13-acetaat (PMA) benadrukt hun nut bij het onderzoeken van de cellulaire mechanismen die ten grondslag liggen aan huidherstel en regeneratie.

Een opvallend kenmerk van Kera-308 cellen is hun dosisafhankelijke proliferatierespons, die aanzienlijk kan worden versterkt door externe prikkels zoals Morus alba wortelextract. Dit kenmerk maakt van Kera-308 een uitstekend instrument voor het onderzoeken van de moleculaire onderliggende mechanismen van keratinocytproliferatie en -differentiatie in reactie op therapeutische middelen.

Bovendien biedt het transcriptieprofiel van Kera-308 cellen in wondgenezingsscenario's, met name hun upgereguleerde keratinefilament en CXCL12/CXCR4 signalering, onschatbare inzichten in de cellulaire en moleculaire dynamiek die speelt tijdens huidherstel. De betrokkenheid van deze signaalwegen onderstreept het belang van Kera-308 cellen bij het verkennen van nieuwe therapeutische strategieën voor het verbeteren van wondgenezing en het behandelen van huidaandoeningen.

Weefsel
Huid
Ziekte
Papilloom van de muizenhuid
Synoniemen
  • KERA-308
  • 308
  • Line 308

02Classificatie

Organisme
Muis
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Celtype
Keratinocyt

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
Kera-308 (Cytion catalogusnummer 400429)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_5782

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
TrypLE Express (Life Technologies)
Heruitplanten
Verwijder medium en spoel de adherente cellen met PBS zonder calcium en magnesium (3-5 ml PBS voor T25, 5-10 ml voor T75 celkweekflessen). Voeg Tryple Express toe (1-2 ml per T25, 2,5 ml per T75 celkweekfles), het celblad moet volledig bedekt zijn. Incubeer 15 minuten bij 37 graden. Resuspendeer de cellen voorzichtig met 10 ml medium (gebruik indien nodig een celschraper), centrifugeer 5 minuten bij 300xg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven met vers medium.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Soort / ondersoort
BALB/c