Przejdź do treści
Kera-308
Chusteczka
Skóra
Choroba
Brodawczak skóry myszy
Synonimy
KERA-308, 308, Line 308

Dokumenty

Kera-308

Cell line · Numer produktu 400429

The Kera-308 cell line, established from adult mouse skin keratinocytes, offers a versatile model for studying the intricate processes of skin physiology,...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa Kera-308, utworzona z keratynocytów skóry dorosłych myszy, oferuje wszechstronny model do badania skomplikowanych procesów fizjologii skóry, w szczególności gojenia się ran i funkcji keratynocytów. Ta linia komórkowa wykazuje niezwykłą zdolność do zwiększania ekspresji keratyny, w tym typów keratyny indukowanych raną, takich jak Krt6a, w określonych warunkach, takich jak leczenie ekstraktem z korzenia Morus alba. Reaktywność komórek Kera-308 na 12-myristan 13-octanu forbolu (PMA) podkreśla ich przydatność w badaniu mechanizmów komórkowych leżących u podstaw naprawy i regeneracji skóry.

Cechą wyróżniającą komórki Kera-308 jest ich zależna od dawki odpowiedź proliferacyjna, która może być znacznie wzmocniona przez bodźce zewnętrzne, takie jak ekstrakt z korzenia Morus alba. Ta cecha sprawia, że Kera-308 jest doskonałym narzędziem do badania molekularnych podstaw proliferacji i różnicowania keratynocytów w odpowiedzi na czynniki terapeutyczne.

Co więcej, profil transkrypcyjny komórek Kera-308 w scenariuszach gojenia się ran, w szczególności ich regulowane w górę włókno keratynowe i sygnalizacja CXCL12/CXCR4, zapewnia nieoceniony wgląd w dynamikę komórkową i molekularną podczas naprawy skóry. Zaangażowanie tych szlaków sygnałowych podkreśla znaczenie komórek Kera-308 w badaniu nowych strategii terapeutycznych w celu poprawy gojenia się ran i leczenia chorób skóry.

Chusteczka
Skóra
Choroba
Brodawczak skóry myszy
Synonimy
  • KERA-308
  • 308
  • Line 308

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Typ komórki
Keratynocyt

04Identyfikatory

Źródło
Kera-308 (numer katalogowy Cytion 400429)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5782

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
TrypLE Express (Life Technologies)
Hodowla komórek w subkulturze
Usunąć pożywkę i przepłukać przylegające komórki używając PBS bez wapnia i magnezu (3-5 ml PBS na kolbę T25, 5-10 ml na kolbę T75). Dodaj Tryple Express (1-2 ml na kolbę T25, 2,5 ml na kolbę T75), arkusz komórek musi być całkowicie przykryty. Inkubować w temperaturze 37 stopni przez 15 minut. Ostrożnie ponownie zawiesić komórki w 10 ml pożywki (w razie potrzeby użyć skrobaka do komórek), wirować przez 5 minut przy 300xg, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść do nowych kolb zawierających świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Rasa / podgatunek
BALB/c