Lec1

La lignée cellulaire Lec1 est un clone mutant sélectionné pour sa résistance à l'agglutinine de germe de blé, dérivé du clone CHO parental Pro-5. Ce processus de sélection a abouti à une lignée cellulaire présentant un défaut spécifique de glycosylation, caractérisé par la présence de glucides N-liés avec un intermédiaire Man5-GlcNAc2-Asn bloqué. Ce blocage est dû à l'absence de N-acétylglucosaminyltransférase I (GlcNAc-TI), une enzyme essentielle à la progression de la synthèse des glycanes vers des formes plus complexes. En conséquence, les cellules Lec1 accumulent des glycoprotéines comportant des oligosaccharides tronqués de type à haute teneur en mannose.

Les cellules Lec1 sont d'une valeur inestimable pour l'étude de la biosynthèse des glycoprotéines, en particulier pour comprendre comment une glycosylation N-liée altérée affecte la fonction cellulaire. Les chercheurs utilisent les cellules Lec1 pour étudier l'impact de la glycosylation sur le repliement des protéines, leur stabilité, la fonction des récepteurs et le trafic intracellulaire. De plus, ces cellules constituent une plateforme unique pour étudier la compartimentation des glycoprotéines endogènes induites par une infection virale ou par la transfection d'ADN étranger. Les structures glycanes simplifiées des cellules Lec1 les rendent également idéales pour la production de glycoprotéines plus faciles à analyser dans divers contextes expérimentaux.

Elles sont principalement utilisées in vitro pour des études mécanistiques et des applications biotechnologiques impliquant la production et l'analyse de glycoprotéines.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie