Gå direkt till innehållet
Lec1
Vävnad
Äggstock
Synonymer
CHO-Lec1, CHO Lec1, Pro-Lec1.3C, Pro-5 Lec1.3c, Pro-5WgaRI3C

Lec1

Cell line · Produktnummer 305010

The Lec1 cell line is a mutant clone selected for its resistance to wheat germ agglutinin, derived from the parental CHO clone Pro-5. This selection proce...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen Lec1 är en muterad klon som har selekterats för sin resistens mot vetegroddsagglutinin och härstammar från den ursprungliga CHO-klonen Pro-5. Denna selektionsprocess resulterade i en cellinje med en specifik glykosyleringsdefekt, som kännetecknas av förekomsten av N-bundna kolhydrater med ett blockerat Man5-GlcNAc2-Asn-mellanprodukt. Denna blockering beror på frånvaron av N-acetylglukosaminyltransferas I (GlcNAc-TI), ett enzym som är avgörande för att glykansyntesen ska kunna fortskrida till mer komplexa former. Som ett resultat ackumulerar Lec1-celler glykoproteiner med trunkerade oligosackarider av typen högmannos.

Lec1-celler är ovärderliga för studier av glykoproteinbiosyntes, särskilt för att förstå hur förändrad N-länkad glykosylering påverkar cellfunktionen. Forskare använder Lec1-celler för att undersöka glykosyleringens inverkan på proteinfällning, stabilitet, receptorfunktion och intracellulär transport. Dessutom utgör dessa celler en unik plattform för att studera kompartimenteringen av endogena glykoproteiner som inducerats av virusinfektion eller transfektion av främmande DNA. De förenklade glykanstrukturerna i Lec1-celler gör dem också idealiska för att producera glykoproteiner som är lättare att analysera i olika experimentella sammanhang.

De används främst in vitro för mekanistiska studier och biotekniska tillämpningar som involverar glykoproteinproduktion och -analys.

Vävnad
Äggstock
Synonymer
  • CHO-Lec1
  • CHO Lec1
  • Pro-Lec1.3C
  • Pro-5 Lec1.3c
  • Pro-5WgaRI3C

02Klassificering

Organism
Kinesisk hamster
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifierare

Källa
Lec1 (Cytion katalognummer 305010)
NCBI-skattenummer
10029
Cellosaurus
CVCL_3440

05Hantering och odling

Odlingsmedium
Alpha MEM, med: 2,0 mM stabilt glutamin, utan Ribonukleosider, w/o: Deoxyribonukleosider, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
2 till 4 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Donatorns ålder
Vuxen