Lec1

La linea cellulare Lec1 è un clone mutante selezionato per la sua resistenza all'agglutinina del germe di grano, derivato dal clone CHO parentale Pro-5. Questo processo di selezione ha portato alla creazione di una linea cellulare con un difetto specifico di glicosilazione, caratterizzato dalla presenza di carboidrati N-legati con un intermedio Man5-GlcNAc2-Asn bloccato. Questo blocco è dovuto all'assenza di N-acetilglucosaminiltransferasi I (GlcNAc-TI), un enzima fondamentale per la progressione della sintesi dei glicani verso forme più complesse. Di conseguenza, le cellule Lec1 accumulano glicoproteine con oligosaccaridi troncati di tipo ad alto contenuto di mannosio.

Le cellule Lec1 sono preziose per lo studio della biosintesi delle glicoproteine, in particolare per comprendere come la glicosilazione N-legata alterata influisca sulla funzione cellulare. I ricercatori utilizzano le cellule Lec1 per studiare l'impatto della glicosilazione sul ripiegamento delle proteine, sulla stabilità, sulla funzione dei recettori e sul traffico intracellulare. Inoltre, queste cellule forniscono una piattaforma unica per lo studio della compartimentazione delle glicoproteine endogene indotte dall'infezione virale o dalla trasfezione di DNA estraneo. Le strutture glicane semplificate nelle cellule Lec1 le rendono ideali anche per la produzione di glicoproteine più facili da analizzare in vari contesti sperimentali.

Sono utilizzate principalmente in vitro per studi meccanicistici e applicazioni biotecnologiche che coinvolgono la produzione e l'analisi di glicoproteine.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia