Lec1

Lec1 hücre hattı, ebeveyn CHO klonu Pro-5’ten türetilmiş olup, buğday tohumu aglütininine karşı direnci nedeniyle seçilmiş bir mutant klondur. Bu seçilim süreci, Man5-GlcNAc2-Asn ara ürününün bloke olmasıyla karakterize edilen, spesifik bir glikozilasyon kusuruna sahip bir hücre hattının ortaya çıkmasına neden olmuştur. Bu tıkanma, glikan sentezinin daha karmaşık formlara ilerlemesi için kritik öneme sahip bir enzim olan N-asetilglukozaminiltransferaz I'in (GlcNAc-TI) yokluğundan kaynaklanmaktadır. Sonuç olarak, Lec1 hücreleri, kesik, yüksek mannoz tipi oligosakkaritlere sahip glikoproteinler biriktirir.

Lec1 hücreleri, glikoprotein biyosentezinin incelenmesi, özellikle de değişmiş N-bağlı glikozilasyonun hücre fonksiyonunu nasıl etkilediğinin anlaşılması açısından paha biçilmez bir değere sahiptir. Araştırmacılar, glikozilasyonun protein katlanması, stabilitesi, reseptör fonksiyonu ve hücre içi trafiği üzerindeki etkisini araştırmak için Lec1 hücrelerini kullanmaktadır. Ayrıca, bu hücreler, viral enfeksiyonun veya yabancı DNA transfeksiyonunun neden olduğu endojen glikoproteinlerin kompartmanlaşmasını incelemek için eşsiz bir platform sunmaktadır. Lec1 hücrelerindeki basitleştirilmiş glikan yapıları, bu hücreleri çeşitli deneysel bağlamlarda analizi daha kolay olan glikoproteinlerin üretimi için ideal hale getirmektedir.

Bu hücreler, öncelikle glikoprotein üretimi ve analizini içeren mekanistik çalışmalar ve biyoteknolojik uygulamalar için in vitro olarak kullanılır.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın