- الأنسجة
- المبيض
- المرادفات
- CHO-Lec1, CHO Lec1, Pro-Lec1.3C, Pro-5 Lec1.3c, Pro-5WgaRI3C
المستندات
Lec1
Cell line · رقم المنتج 305010
The Lec1 cell line is a mutant clone selected for its resistance to wheat germ agglutinin, derived from the parental CHO clone Pro-5. This selection proce...
التخصيص / التوصيات
- Lec1Cell line€430.00
موصى بها (أحدث دفعة)
01معلومات عامة
- الوصف
سلسلة الخلايا Lec1 هي نسخة متحولة تم انتقاؤها لمقاومتها لـ«أجلوتينين جنين القمح»، وهي مشتقة من النسخة الأم CHO Pro-5. وقد أسفرت عملية الانتقاء هذه عن سلسلة خلايا تعاني من خلل محدد في عملية الغليكوزيلاتيون، يتميز بوجود كربوهيدرات مرتبطة بـN مع وجود مادة وسيطة Man5-GlcNAc2-Asn معطلة. ويرجع هذا الانسداد إلى غياب إنزيم N-acetylglucosaminyltransferase I (GlcNAc-TI)، وهو إنزيم ضروري لتقدم عملية تخليق الجليكان إلى أشكال أكثر تعقيدًا. ونتيجة لذلك، تتراكم في خلايا Lec1 بروتينات سكرية تحتوي على أوليغوساكاريدات مقطوعة من النوع عالي المانوز.
تعد خلايا Lec1 ذات قيمة لا تقدر بثمن لدراسة التخليق الحيوي للبروتينات السكرية، لا سيما في فهم كيفية تأثير الجليكوزيلاتيون المرتبط بـ N المتغير على وظيفة الخلية. يستخدم الباحثون خلايا Lec1 لدراسة تأثير الجليكوزيلاتيون على طي البروتين واستقراره ووظيفة المستقبلات والانتقال داخل الخلايا. بالإضافة إلى ذلك، توفر هذه الخلايا منصة فريدة لدراسة تجزئة البروتينات السكرية الذاتية الناتجة عن العدوى الفيروسية أو عن نقل الحمض النووي الغريب. كما تجعل هياكل الجليكان المبسطة في خلايا Lec1 هذه الخلايا مثالية لإنتاج بروتينات سكرية يسهل تحليلها في سياقات تجريبية متنوعة.
وتُستخدم هذه الخلايا بشكل أساسي في المختبر لإجراء الدراسات الآلية والتطبيقات التكنولوجية الحيوية التي تتضمن إنتاج البروتينات السكرية وتحليلها.
- الأنسجة
- المبيض
- المرادفات
- CHO-Lec1
- CHO Lec1
- Pro-Lec1.3C
- Pro-5 Lec1.3c
- Pro-5WgaRI3C
02التصنيف
- كائن حي
- الهامستر الصيني
- خصائص النمو
- الملتزم
- مستوى السلامة البيولوجية
- 1
03الخصائص
- المورفولوجيا
- الظهارة
04المعرّفات
- المرجع
- Lec1 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305010)
- رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
- 10029
- سيلوصور
- CVCL_3440
05التعامل مع النباتات وزراعتها
- وسط الاستزراع
- Alpha MEM، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث / س: ريبونوكليوسيدات، ث: 1.0 ميلي مولار بيروكليوسيدات الصوديوم: ديوكسي ريبونوكليوسيدات، ث: 1.0 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3
- بيئة الحضانة
37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
- المكملات الغذائية
- قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
- كاشف التفكك
- أكوتاس
- إعادة الاستنبات
- قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
- كثافة البذر
- 2 إلى 4 × 104 خلية/سم2
- تجديد السوائل
- 2 إلى 3 مرات في الأسبوع
- إذابة الثلج والزراعة
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد
- العقم
يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.
ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.
- وسط التجميد
- كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
- شروط التخزين
للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.
- شروط الشحن
تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
07المانح
- عمر المتبرع
- للبالغين
08الشؤون القانونية والسلامة
- احتياطات السلامة
- عند التخطيط لتخزين القارورة المبردة في النيتروجين السائل لإذابتها في المستقبل، من الضروري الالتزام بتدابير السلامة الصارمة. من الضروري ارتداء قفازات وملابس واقية مناسبة، كما يلزم استخدام قناع الوجه أو نظارات السلامة أثناء نقل العينات المجمدة من خزان النيتروجين السائل أو إليه. وذلك للتخفيف من خطر الإصابة من الانفجارات المحتملة للنيتروجين المبرد عند الإزالة، والتي يمكن أن تؤدي إلى قذف شظايا حادة.
- الضمان
في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج
للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان
- يلزم إبرام اتفاقية نقل المواد
- نعم