Lec1

Lec1-solulinja on vehnänalkioagglutiniinille resistenssinsä perusteella valittu mutanttiklooni, joka on peräisin emokloonista Pro-5. Valintaprosessin tuloksena syntyi solulinja, jolla on erityinen glykosylaatiovirhe, jolle on ominaista N-sidottujen hiilihydraattien esiintyminen, joissa Man5-GlcNAc2-Asn-välituote on estynyt. Tämä estyminen johtuu N-asetyyliglukosaminyylitransferaasi I:n (GlcNAc-TI) puuttumisesta, joka on entsyymi, joka on kriittinen glykaanisynteesin etenemiselle monimutkaisempiin muotoihin. Tämän seurauksena Lec1-solut kertyvät glykoproteiineja, joissa on katkaistuja, korkeamannoosityyppisiä oligosakkarideja.

Lec1-solut ovat korvaamattomia glykoproteiinien biosynteesin tutkimuksessa, erityisesti kun halutaan ymmärtää, miten muuttunut N-sidottu glykosylaatio vaikuttaa solujen toimintaan. Tutkijat käyttävät Lec1-soluja tutkiakseen glykosylaation vaikutusta proteiinien taitumiseen, stabiiliuteen, reseptoritoimintaan ja solunsisäiseen kuljetukseen. Lisäksi nämä solut tarjoavat ainutlaatuisen alustan virusinfektion tai vieraan DNA:n transfektion aiheuttamien endogeenisten glykoproteiinien kompartmentalisoitumisen tutkimiseen. Lec1-solujen yksinkertaistetut glykaanirakenteet tekevät niistä myös ihanteellisia sellaisten glykoproteiinien tuottamiseen, joita on helpompi analysoida erilaisissa kokeellisissa yhteyksissä.

Niitä käytetään pääasiassa in vitro mekanistisissa tutkimuksissa ja bioteknologisissa sovelluksissa, joihin liittyy glykoproteiinien tuotanto ja analysointi.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa